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INTRODUCTION AU COURS D'ANATOMIE PATHOLOGIQUE. ÉTAPES DU DÉVELOPPEMENT DE L’ANATOMIE PATHOLOGIQUE. CONTENU, OBJECTIFS, OBJETS ET MÉTHODES DE RECHERCHE



Le terme "pathologie", composé de deux mots grecs, signifie "la science de la maladie". La discipline, qui est actuellement désignée par ce terme dans la plupart des pays, porte plusieurs autres noms: anatomie pathologique, pathomorphologie, anatomie morbide, anatomie pathologique, histopathologie, pathologie chirurgicale, etc. En médecine interne, il est d'usage de qualifier cette discipline "d'anatomie pathologique". L'anatomie pathologique est une discipline scientifique et appliquée qui étudie les processus pathologiques et les maladies à l'aide d'une étude scientifique, principalement microscopique, des changements qui se produisent dans les cellules et les tissus.

Par processus pathologique, on entend toute violation de la structure et de la fonction, et une maladie est une combinaison d'un ou plusieurs processus pathologiques conduisant à une violation de l'état normal et des fonctions vitales du corps.

On distingue quatre périodes dans l'histoire du développement de l'anatomie pathologique: anatomique (de l'Antiquité au début du 19ème siècle), microscopique (du premier tiers du 19ème siècle aux années 50 du 20ème siècle), ultramicroscopique (après les années 50 du 19ème siècle). ) la quatrième période moderne du développement de l'anatomie pathologique peut être caractérisée comme la période de l'anatomie pathologique d'une personne vivante.

La possibilité d'étudier les changements pathologiques dans les organes du corps humain est apparue aux XVe-XVIIe siècles. en raison de l'émergence et du développement de l'anatomie scientifique. Le rôle le plus important dans la création de la méthode de recherche anatomique, la description de la structure de tous les organes les plus importants et leur position relative jouée au milieu du XVIe siècle œuvres de A. Vesalius, G. Fallopius, R. Colombo et B. Eustachius.

Études anatomiques de la seconde moitié du XVIème - début du XVIIème siècle. non seulement a renforcé la position de l'anatomie, mais a également contribué à l'émergence d'un intérêt croissant de la part des médecins. Le philosophe F. Bacon et l'anatomiste W. Garvey ont exercé une influence notable sur l'évolution de l'anatomie au cours de cette période.

En 1676, T. Bonet fit une première tentative sur un matériau significatif (3 000 autopsies) pour démontrer l'existence d'un lien entre les changements morphologiques détectés et les manifestations cliniques de la maladie.

Au XVIIème siècle. les plus riches musées d'anatomie (Leiden) sont apparus en Europe, dans lesquels les préparations pathoanatomiques étaient largement représentées.

L’événement le plus important de l’histoire de l’anatomie pathologique, qui a déterminé son isolement en tant que science indépendante, a été la publication en 1761 du travail principal de JB Morgani "Sur la localisation et les causes des maladies identifiées par l’anatomiste."

À la fin du XVIIIème siècle de nombreux travaux basés sur le principe des comparaisons anatomiques cliniques proposés par JB Morgagni ont été publiés.

Au tournant des XVIII et XIX siècles. en France, J. Corvisard, R. Laennec, G. Dupuytren, K. Lobstein, J. Buillot, J. Crewele ont largement introduit l'anatomie pathologique dans la pratique clinique et M. K. Bichat a indiqué une nouvelle voie pour son développement - l'étude des dommages au niveau des tissus . L'élève de M.K.Bisha F. Brusset a créé un enseignement qui rejetait l'existence de maladies dépourvues de substrat matériel. J. Crewellier publié en 1829-1835. premier atlas de couleurs au monde sur l'anatomie pathologique.

Au milieu du XIXème siècle. La plus grande influence sur le développement de cette branche de la médecine a été exercée par les travaux de K. Rokitansky, dans lesquels il présentait non seulement des modifications des organes à différents stades de l’évolution des maladies, mais clarifiait également la description des modifications pathologiques touchant de nombreuses maladies. En 1844, K.Rokitansky a fondé le département d'anatomie pathologique de l'Université de Vienne et créé le plus grand musée d'anatomie pathologique du monde. Le nom de K. Rokitansky est associé à la séparation finale de l'anatomie pathologique en une discipline scientifique indépendante et une spécialité médicale. Le tournant de l'évolution de cette discipline fut la création en 1855 par R. Virkhov de la théorie de la pathologie cellulaire.

En Russie, les premières tentatives d'organisation d'une activité prosectorielle remontent au 18ème siècle. Ils sont associés aux activités d’organisateurs de premier plan dans le domaine des soins de santé - I. Fisher et P.Z. Kondoidi. Ces tentatives n’ont pas donné de résultats tangibles en raison du faible développement de la médecine russe et de la situation de l’enseignement médical, même si à cette époque une autopsie était pratiquée à des fins de contrôle, de diagnostic et de recherche.

La formation de l'anatomie pathologique en tant que discipline scientifique n'a débuté que dans le premier quart du XIXe siècle. et a coïncidé avec une amélioration de l'enseignement de l'anatomie normale dans les universités.

E.O. Mukhin a été l'un des premiers anatomistes à attirer l'attention des étudiants sur les modifications pathologiques d'organes subies lors de l'autopsie.

Pour la première fois, la question de la nécessité d'inclure l'anatomie pathologique dans le nombre de matières d'enseignement obligatoire à la faculté de médecine de l'université de Moscou a été posée en 1805 par M. Ya. Mudrov dans une lettre au responsable de l'université, M. Muravyev. Sur la suggestion de Yu.H. Loder, l'enseignement de l'anatomie pathologique en tant que cours au département d'anatomie normale a été repris dans la charte universitaire de 1835. Conformément à cette charte, l'enseignement du cours indépendant d'anatomie pathologique a été lancé en 1837 par le prof. L. Sevrukom au département d'anatomie normale. Les professeurs G.I. Sokolsky et A.I. Over ont commencé à utiliser les dernières informations pathologiques dans l'enseignement des disciplines thérapeutiques, et F.I. Inozemtsev et A.I. Pol - lors de conférences sur le déroulement de la chirurgie.

En 1841, dans le cadre de la création d'une nouvelle faculté de médecine à Kiev, N.I. Pirogov soulève la question de la nécessité d'ouvrir un département d'enseignement de la pathologie à l'université de Saint-Vladimir. Conformément à la charte de cette université (1842), l'ouverture du département d'anatomie pathologique et de physiologie pathologique était prévue à compter de 1845. Elle était dirigée par N.I. Kozlov, étudiant à N.I. Pirogov.

Le 7 décembre 1845, la "Résolution additionnelle sur la faculté de médecine de l'Université impériale de Moscou" fut adoptée, prévoyant la création du département d'anatomie pathologique et de physiologie pathologique. En 1846, Y. Dietrich, auxiliaire de la clinique thérapeutique de la faculté, dirigé par A.I. Over, fut nommé professeur de ce département. Après le décès de Yu. Dietrich, quatre adjoints des cliniques thérapeutiques de l'Université de Moscou ont participé au concours pour pourvoir un poste vacant: Samson von Himmeliptern, N.S. Toporov, A.I. Polunin et K.Ya.Mlodzievsky. En mai 1849, A.I. Polunin, auxiliaire de la clinique thérapeutique de l'hôpital I.V. Varvinsky, a été élu professeur au département d'anatomie pathologique et de physiologie pathologique.

La médecine moderne se caractérise par une recherche constante des critères matériels les plus objectifs pour le diagnostic et la connaissance de l’essence même de la maladie. Parmi ces critères, morphologique acquiert une importance exceptionnelle en tant que le plus fiable.

L'anatomie pathologique moderne fait largement appel aux réalisations d'autres disciplines biomédicales, résumant les données actuelles d'études biochimiques, morphologiques, génétiques, physiopathologiques et autres afin d'établir les schémas de travail d'un organe et d'un système particuliers dans diverses maladies.

Grâce aux tâches que résout actuellement l’anatomie pathologique, elle occupe une place particulière parmi les disciplines médicales. L'anatomie pathologique est d'une part une théorie de la médecine qui, révélant le substrat matériel de la maladie, sert directement la pratique clinique, d'autre part, il s'agit d'une morphologie clinique pour le diagnostic, donnant un substrat matériel de la théorie de la médecine - pathologie humaine générale et privée (Serov V.V.,. 1982).

Sous la pathologie générale comprendre le plus commun, à savoir les lois de leur apparition, leur développement et leurs résultats caractéristiques de toutes les maladies. Enracinée dans les manifestations particulières de diverses maladies et basée sur ces particularités, la pathologie générale les synthétise simultanément, donne une idée des processus typiques caractéristiques d'une maladie donnée. Les progrès ultérieurs de la pathologie générale ne peuvent dépendre du développement d’une discipline ou d’un groupe de cette discipline, car la pathologie générale est une expérience concentrée de toutes les branches de la médecine, évaluée dans une perspective biologique large.

Chacune des disciplines médicales et biomédicales modernes contribue à la construction de la théorie de la médecine. La biochimie, l’endocrinologie et la pharmacologie révèlent les mécanismes subtils des processus vitaux au niveau moléculaire; dans les études pathologiques, les lois de la pathologie générale reçoivent une interprétation morphologique; la physiologie pathologique donne leur caractéristique fonctionnelle; la microbiologie et la virologie sont les sources les plus importantes pour le développement des aspects étiologiques et immunologiques de la pathologie générale; la génétique révèle les secrets des réactions individuelles du corps et les principes de leur régulation intracellulaire; La médecine clinique complète la formulation des lois de la pathologie humaine générale sur la base de sa propre expérience et de l'évaluation finale des données expérimentales obtenues du point de vue de facteurs psychologiques, sociaux et autres.

Au stade moderne du développement de la médecine, il est caractéristique que les disciplines qui étaient auparavant principalement, voire exclusivement, expérimentales (génétique, immunologie, biochimie, endocrinologie, physiologie pathologique, etc.) deviennent également cliniques.

Le développement rapide de la physiologie clinique, de la morphologie clinique, de l'immunologie clinique, de la biochimie et de la pharmacologie cliniques, de la génétique médicale, des méthodes fondamentalement nouvelles de recherche par rayons X, de l'endoscopie, de l'échographie, etc., a enrichi la connaissance des détails et des tendances générales du développement de maladies humaines. L’utilisation croissante de méthodes de recherche non invasives (tomodensitométrie, diagnostics par ultrasons, méthodes endoscopiques, etc.) permet de déterminer visuellement la localisation, la taille et même, dans une certaine mesure, la nature du processus pathologique, ce qui ouvre essentiellement la voie au développement de l’anatomie pathologique intravitale - morphologie clinique, qui se consacre à cours d'anatomie pathologique privée.

Le champ de l'analyse morphologique en clinique est en expansion constante en raison de l'activité chirurgicale croissante et du succès de la technologie médicale, ainsi que de l'amélioration des capacités méthodologiques de la morphologie. L’amélioration des instruments médicaux a conduit au fait qu’il n’existe pratiquement aucune partie du corps humain inaccessible au médecin. Dans le même temps, l'endoscopie, qui permet au clinicien de se lancer dans une étude morphologique de la maladie au niveau macroscopique (organe), revêt une importance particulière pour l'amélioration de la morphologie clinique. Les examens endoscopiques servent également à la biopsie, à l’aide de laquelle le pathologiste reçoit du matériel de recherche morphologique et devient un participant à part entière dans la résolution des problèmes de diagnostic, de tactique thérapeutique ou chirurgicale et de pronostic de la maladie. À l'aide de matériel de biopsie, le pathologiste résout également de nombreux problèmes théoriques de la pathologie. Par conséquent, la biopsie devient l’objet principal de l’étude pour résoudre les problèmes pratiques et théoriques de l’anatomie pathologique.

Les possibilités méthodologiques de la morphologie moderne satisfont les aspirations du pathologiste quant à la précision sans cesse croissante de l’analyse morphologique des processus vitaux perturbés et à une évaluation fonctionnelle de plus en plus complète et précise des changements structurels. Les possibilités méthodologiques modernes de la morphologie sont énormes. Ils vous permettent d’étudier les processus pathologiques et les maladies au niveau du corps, du système organique, des organes, des tissus, des cellules, des organites cellulaires et des macromolécules. Ce sont des méthodes macroscopiques et opto-optiques (microscopiques), électro-microscopiques, cytochimiques et histochimiques, immunohistochimiques et autoradiographiques. Il existe une tendance à l'intégration d'un certain nombre de méthodes traditionnelles de recherche morphologique, aboutissant à l'histochimie au microscope électronique, à l'immunocytochimie au microscope électronique et à l'autoradiographie au microscope électronique, ce qui a considérablement élargi les possibilités du pathologiste de diagnostiquer et de comprendre l'essence des maladies.

Outre une évaluation qualitative des processus et des phénomènes observés à l'aide des méthodes les plus récentes d'analyse morphologique, il est possible d'effectuer une évaluation quantitative. La morphométrie a donné aux chercheurs la possibilité d'utiliser des équipements électroniques et des mathématiques pour juger de la fiabilité des résultats et de la légitimité de l'interprétation des régularités révélées.

En utilisant des méthodes de recherche modernes, le pathologiste peut détecter non seulement les changements morphologiques inhérents au tableau détaillé d'une maladie, mais également les changements initiaux de maladies dont les manifestations cliniques sont encore absentes en raison de la viabilité des processus adaptatifs compensatoires (Sarkisov D.S., 1988). Par conséquent, les changements initiaux (période préclinique de la maladie) sont en avance sur leurs premières manifestations cliniques (période clinique de la maladie). Par conséquent, la principale ligne directrice dans le diagnostic des stades initiaux du développement de la maladie concerne les modifications morphologiques des cellules et des tissus.

L'anatomie pathologique, dotée de capacités techniques et méthodologiques modernes, est conçue pour résoudre des problèmes de diagnostic clinique et de recherche.

Bien que le nombre d'autopsies ait régulièrement diminué dans tous les pays au cours des dernières années, la recherche pathoanatomique reste l'une des principales méthodes de connaissance scientifique de la maladie. Avec son aide, un examen de l'exactitude du diagnostic et du traitement est effectué, les causes de décès sont établies. À cet égard, l'autopsie en tant que dernière étape du diagnostic est nécessaire non seulement pour le clinicien et le pathologiste, mais également pour les statistiques médicales et l'organisateur des soins de santé. Cette méthode est la base de la recherche scientifique, de l’enseignement des disciplines médicales fondamentales et appliquées, d’une école de médecin de toutes spécialités. L'analyse des résultats de l'autopsie joue un rôle important dans la résolution d'un certain nombre de problèmes scientifiques et pratiques importants, par exemple le problème de la variabilité ou du pathomorphisme des maladies.

Les objets étudiés par le pathologiste peuvent être divisés en trois groupes: 1) matériel cadavérique, 2) substrats obtenus au cours de la vie des patients (organes, tissus et parties de ceux-ci, cellules et leurs parties, produits de sécrétion, fluides) et 3) matériel expérimental.

Matériel cadavérique.
Traditionnellement, les organes et tissus des cadavres du défunt font l’objet d’une étude au cours de l’autopsie post mortem (autopsies, sections) de personnes décédées des suites d’une maladie. Les cas de décès qui ne sont pas dus à une maladie, mais résultent de crimes, de catastrophes, d'accidents ou de raisons peu claires, font l'objet d'une enquête par des médecins légistes.

Le matériel cadavérique est étudié aux niveaux anatomique et histologique. Les méthodes radiologiques, microbiologiques et biochimiques sont moins utilisées. Les antécédents médicaux et tous les documents médicaux disponibles sont remis au service de pathologie avec le défunt. Avant l'autopsie, le pathologiste doit étudier tout cela, puis inviter les médecins traitants à une autopsie. Les cliniciens doivent s’assurer des résultats qui confirment ou réfutent leurs idées sur les processus et les changements survenus dans le corps au cours de la vie du patient. Le pathologiste consigne les résultats de l’autopsie dans le rapport d’autopsie et les causes du décès du patient sont indiquées dans le certificat de décès, qui est ensuite délivré aux proches du défunt.

Autopsie. L'autopsie a pour objectif principal d'établir le diagnostic final et les causes de décès du patient. L'exactitude ou l'erreur du diagnostic clinique, l'efficacité du traitement sont également évaluées. Il existe des critères pour évaluer les divergences dans les diagnostics cliniques et pathologiques, ainsi qu'une classification des causes des divergences. L'autopsie a également pour objectif d'enrichir mutuellement l'expérience scientifique et pratique des cliniciens et des pathologistes. L’importance du travail de section d’un pathologiste consiste non seulement à surveiller la qualité des activités cliniques et diagnostiques des cliniciens (ce contrôle est complexe et non seulement effectué par des pathologistes), mais également à l’accumulation de données statistiques, scientifiques et pratiques sur les maladies et les processus pathologiques.

Si le travail en coupe est organisé de manière hautement professionnelle et équipée de manière méthodique, sa mise en œuvre complète est très coûteuse. C'est l'une des raisons d'une réduction significative du nombre d'autopsies hospitalières dans un certain nombre de pays industrialisés. Une tendance à la diminution du nombre d'autopsies a été observée en Russie.

Matériel pris pendant la vie du patient. L’analyse microscopique de matériel obtenu à des fins de diagnostic au cours de la vie du patient occupe un volume beaucoup plus important dans le travail du pathologiste. Le plus souvent, ce matériel provient de cliniciens: chirurgiens, gynécologues, urologues, oto-rhino-laryngologistes, ophtalmologistes, etc. Le rôle diagnostique du pathologiste est important et sa conclusion conditionne souvent la formulation du diagnostic clinique.

Examen histologique. Le matériel chirurgical et de biopsie est exposé à cette étude. De la part du pathologiste, une confirmation histologique (clarification) du diagnostic est nécessaire. Dans les deux cas, la fixation immédiate du tissu retiré est importante. Même un contenu pas très long de morceaux ou de substrats retirés dans l'air, dans l'eau ou dans une solution saline peut entraîner des modifications irréversibles et artificielles du matériau, qui compliquent ou empêchent un diagnostic histologique correct.

À partir d’un matériau fixe muni d’un rasoir, on découpe des pièces ne dépassant pas 1 cm de diamètre, puis on les place dans des cassettes spéciales et dans des machines automatiques de câblage histologique.

Des coupes histologiques de 5 à 10 microns d'épaisseur sont collées sur des lames de verre, déparaffinées, colorées d'une manière ou d'une autre, puis enfermées dans un milieu optiquement transparent sous une lamelle.

Avec des biopsies urgentes, souvent lors d'interventions chirurgicales de grande envergure, afin d'obtenir rapidement un diagnostic histologique, le tissu est congelé et coupé sur un cryostat ou un microtome à congélation. Les sections congelées sont généralement plus épaisses que la paraffine, mais elles conviennent au diagnostic préliminaire. Un cryostat et un microtome de congélation sont utilisés pour conserver les composants tissulaires solubles dans l’alcool et qui sont importants pour le diagnostic (par exemple, les graisses).

Pour le diagnostic de routine, la coloration histologique universelle des coupes à l'hématoxyline et à l'éosine est largement utilisée. Tinctorial, c'est-à-dire les propriétés colorantes de l'hématoxyline sont réalisées dans un milieu légèrement alcalin, et les structures teintées avec ce colorant en bleu ou bleu foncé sont appelées basophiles. Ceux-ci comprennent les noyaux cellulaires, les dépôts de sel de chaux et les colonies bactériennes. Une basophilie faible peut donner certains types de mucus. L’éosine, au contraire, à un pH inférieur à 7, colore les composants dits oxyphiles en rose-rouge ou rouge. Ceux-ci comprennent le cytoplasme des cellules, des fibres, des globules rouges, des masses protéiques et la plupart des types de mucus. Très souvent, la coloration à la picrofuchsine est utilisée selon van Gieson, de manière élective, c'est-à-dire coloration sélective des fibres de collagène rouge du tissu conjonctif, tandis que les autres structures deviennent jaunes ou jaune verdâtre. Il existe également de nombreuses taches histologiques pour identifier certains composants de substrats tissulaires ou pathologiques.

Examen cytologique. Elle est réalisée sur des frottis constitués du contenu d'organes creux ou tubulaires, ainsi que sur des empreintes digitales, des perforations et des aspirations (perforations aspirées, aspirées à l'aide d'une seringue). Les frottis sont souvent fabriqués à partir d’écouvillons prélevés sur les parois des organes, ce qui vous permet de capturer des cellules en cours de desquamation naturelle ou pathologique (desquamation, exfoliation), par exemple à partir du col de l’utérus. Une intervention plus active consiste à gratter les murs des organes. Si le matériel de grattage est abondant, il est traité selon des méthodes histologiques. En particulier, ils le font avec des raclages diagnostiques de l'endomètre. Avec de rares raclages, le matériau entre en traitement cytologique. Les médicaments sont souvent fabriqués à partir de crachats, de mucus, de trains de tissus et de sédiments dans des liquides. La précipitation peut être obtenue après centrifugation des suspensions.

Le matériel cytologique est généralement fixé directement sur une lame de verre, souvent pendant la coloration. Les couleurs les plus populaires sont: l'azur-éosine (ses propriétés tinkgoriales sont proches de l'hématoxyline et de l'éosine) ou le brun bismarck selon Papanicolaou.

Etude immunohistochimique. Dans certaines conditions pathologiques, notamment les tumeurs, il est difficile, voire impossible, de déterminer le type de tissu ou son origine (histogenèse) à l'aide de colorants histologiques ou cytologiques. En attendant, cette vérification est importante pour le diagnostic et le pronostic. Par conséquent, diverses approches méthodologiques supplémentaires sont utilisées. L'un d'eux est la méthode immunohistochimique. Des solutions contenant des anticorps dirigés contre les antigènes souhaités sont appliquées aux préparations histologiques ou cytologiques: tumeur, virus, virus, microbiens, auto-antigènes, etc. Les antigènes ne sont pas visibles avec les taches histologiques normales des tissus. Les anticorps présents dans les sérums portent l’étiquette: soit un fluorochrome, c’est-à-dire un colorant rougeoyant dans un champ sombre (en d'autres termes, donnant de la fluorescence) ou une enzyme colorante. Si l'antigène souhaité se trouve dans les tissus ou cellules étudiés, le complexe antigène-anticorps obtenu, ainsi que le marqueur, indiqueront avec précision sa localisation, sa quantité et aideront à étudier certaines propriétés.

L'immunofluorescence est le plus souvent utilisée dans l'étude de coupes préparées dans un cryostat ou sur un microtome de congélation, ainsi que dans l'étude de préparations cytologiques. On utilise des anticorps sériques, appelés antisérums, conjugués le plus souvent à un fluorochrome aussi fiable que l'isothiocyanate de fluorescéine. La méthode la plus répandue est la méthode indirecte, qui permet la détection d’antigènes par une double réaction avec des anticorps.

La méthode immunoperoxydase est encore plus courante. Les anticorps du sérum colorant ne sont pas le fluorochrome, mais l'enzyme - la peroxydase de raifort, moins souvent une autre enzyme, par exemple la phosphatase alcaline. Il existe plusieurs variantes de cette méthode. Deux d'entre elles sont le plus souvent utilisées: la peroxydase-antiperoxydase (méthode PAP) et la méthode du complexe avidine-biotine (méthode ABC).

Dans la méthode PAP, la chaîne d'anticorps intermédiaires liant l'enzyme à l'antigène est légèrement plus longue que dans la méthode d'immunofluorescence indirecte. Enzyme, c'est-à-dire l'anticorps peroxydase se lie à l'anticorps primaire déjà présent sur l'antigène par un autre pont d'anticorps.

Dans le procédé à l'avidine-biotine, l'anticorps primaire situé sur l'antigène et marqué à la biotine se lie au complexe PAP par le biais d'un anticorps intermédiaire marqué à l'avidine. Les deux protéines, l'avidine et la biotine, augmentent considérablement la qualité de la réaction, de sorte que la méthode ABC est considérée comme plus sensible.

Pour les réactions immunohistochimiques, 2 types d'anticorps sont utilisés: poly- et monoclonaux. Le premier est obtenu à partir d'antisérums de lapins immunisés. Les anticorps monoclonaux sont obtenus en culture tissulaire ou à partir de liquide d'ascite provenant de la cavité abdominale d'animaux de laboratoire. Les anticorps monoclonaux sont absolument spécifiques de l'antigène et ne donnent pas de réactivité croisée.

La popularité de la méthode immunoperoxydase est principalement due à sa simplicité et à son accessibilité. Il existe de nombreux kits commerciaux de sérums pour différents antigènes spécifiques de tissus ou de tumeurs, appelés marqueurs. Une sensibilité élevée (comparée à l’immunofluorescence, la méthode PAP est 1000 fois plus sensible et la méthode ABC, 10 000 fois plus sensible), la stabilité relative, la possibilité d’appliquer certaines réactions à des sections déparaffinées ayant subi la fixation et le câblage à travers des alcools présentent des avantages.

Méthodes de biologie moléculaire. Les départements de pathologie et les instituts de recherche bien équipés utilisent des méthodes de biologie moléculaire pour le diagnostic intravital: cytométrie en flux et technique d’hybridation in situ, c.-à-d. en place, sur une coupe histologique. La première méthode est nécessaire pour l'analyse quantitative du contenu en ADN dans les cellules tumorales. À cette fin, le morceau de tissu non fixé étudié est soumis à une désagrégation à l'aide d'enzymes, c'est-à-dire séparation et broyage pour séparer les cellules. Ensuite, dans une installation spéciale, un flux d'une suspension de cellules isolées d'une épaisseur de 1 cellule, entourée du liquide enveloppant, traverse le faisceau laser de lecture.

L’hybridation in situ permet la combinaison de matériel génétique (fragments d’ADN, gènes) in vitro sur la base de la complémentarité, c.-à-d. correspondance mutuelle, par exemple, de bases de purine ou de pyrimidine dans des acides nucléiques. Cette méthode est principalement utilisée dans trois domaines de pathologie: pour l'identification par le génome de microbes ou de virus trouvés dans les tissus ou les fluides; étudier le génome avec ses troubles congénitaux; dans le diagnostic des tumeurs, en particulier pour la reconnaissance des oncogènes viraux. Il y a beaucoup de modifications à la méthode.

La réaction en chaîne de la polymérase (PCR), qui est effectuée directement sur des coupes histologiques, est très populaire. Initialement, l’ADN de test est dénaturé, c’est-à-dire la séparation de ses deux fils en spirale et la réception de l'un d'eux dans un état isolé. Puis en couches un autre fil étranger (généralement l'ARN), marqué avec un complexe fluorochrome ou PAP. La structure moléculaire de ce filament, c'est-à-dire la séquence de ses fondements est connue. S'il existe une complémentarité avec le fil étudié, la réaction de teinture sur la préparation histologique est positive et la structure de ce fil devient connue.

L'étude des chromosomes. Dans de nombreux départements de pathologie et instituts de recherche modernes, une analyse chromosomique est effectuée pour déterminer les anomalies de l'appareil génétique (génome) des cellules congénitales ou acquises.

Cette analyse revêt une importance particulière dans la reconnaissance et l’étude des tumeurs, dont diverses variantes sont accompagnées de réarrangements très spécifiques des marqueurs ou d’aberrations des chromosomes. Pour cela, le tissu intravital est cultivé, c'est-à-dire cultivé sur un support artificiel. Ce procédé de culture permet, par réensemencement et sélection de cellules, d’obtenir une culture de cellules d’un type de tissu et même d’un clone, c.-à-d. une lignée provenant d'une seule cellule souche.

Les principales étapes de l'analyse chromosomique sur l'exemple de l'étude des lymphocytes sanguins sont les suivantes. La phytohémagglutinine est ajoutée à l'hémoculture héparinisée (l'héparine, un anticoagulant), en stimulant la transformation des lymphocytes T en blastes (formes moins matures, capables de mitose et de division). Après 2-3 jours d'incubation, la colchicine est introduite dans la culture pour retarder la mitose au stade métaphasique dans les lymphocytes en division. C'est dans la mégaphase que les chromosomes semblent aplatir, ce qui convient à l'étude. Ensuite, les cellules sont transférées sur une lame de verre, fixée et colorée, le plus souvent par la méthode de Giemsa. En conséquence, des bandes claires (non peintes) et sombres (colorées) sont détectées dans chaque paire de chromosomes et la méthode est donc appelée support de chromosome. La disposition des bandes dans le caryotype normal (ensemble de chromosomes) est très spécifique pour chaque paire de chromosomes, et les diagrammes de bandes (cartes) sont normalement bien connus.

L'analyse chromosomique fait référence à des méthodes économiquement coûteuses et est donc rarement utilisée.

Microscopie électronique. La microscopie électronique est souvent utilisée dans le cadre d’études diagnostiques sur le matériel prélevé au cours de la vie du patient: transmission (dans un faisceau transmis, analogue à la microscopie optique) et scannage (élimination du relief superficiel). Le premier est utilisé plus souvent, en particulier pour étudier les détails de la structure cellulaire dans les coupes de tissus ultra-minces, identifier les microbes, les virus, les dépôts de complexes immuns, etc. La recherche en ultrastructure est très coûteuse, mais elle est souvent utilisée à des fins diagnostiques et scientifiques.

Matériel expérimental. En examinant les tissus prélevés au cours de la vie ou après le décès d'un malade, le pathologiste observe les modifications au moment du prélèvement. Ce qui est arrivé avant et peut être après reste inconnu. Une expérience sur un nombre suffisant d'animaux de laboratoire (souris blanches, rats blancs, cobayes, lapins, chiens, singes, etc.) nous permet de modéliser et d'étudier des maladies et des processus pathologiques à n'importe quel stade de leur développement.

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INTRODUCTION AU COURS D'ANATOMIE PATHOLOGIQUE. ÉTAPES DU DÉVELOPPEMENT DE L’ANATOMIE PATHOLOGIQUE. CONTENU, OBJECTIFS, OBJETS ET MÉTHODES DE RECHERCHE

  1. Le sujet et les tâches de l'anatomie pathologique. Méthodes d'étude de l'anatomie pathologique. Autopsie
    Nous vous proposons des tâches dans lesquelles il peut y avoir une, deux, trois réponses correctes ou plus. Choisissez les numéros de toutes les bonnes réponses! Dans les tâches d’autres formes, procédez conformément aux instructions qui y figurent. 1. Le terme «étiologie» appliqué à une maladie signifie 1. complications 2. variabilité 3. mécanisme du décès 4. cause du développement 5. mécanisme du développement 6. clinique
  2. Cours de conférences. Anatomie pathologique, 1998

  3. Edité par M. Paltsev, cours magistral sur l'anatomie pathologique, 2003

  4. Basinsky V.A., Prokopchik N.I., Silyaeva N.F. Cours de conférences sur l'anatomie pathologique, 2009

  5. EXEMPLE DE LISTE DE QUESTIONS RECOMMANDÉES POUR L’ÉLABORATION DE LA NORME POUR L’ANATOMIE PATHOLOGIQUE
    A. Anatomie pathologique générale 1. Sujet et contenu de l'anatomie pathologique, ses tâches. Objets, méthodes et niveaux de recherche. 2. Le service de pathologie et son importance dans le système de santé domestique. Conférences cliniques et pathologiques, concepts généraux. 3. Le problème de l'unité de structure et de fonction dans l'anatomie pathologique, la relation entre les parties et le tout. Exemples 4. développement
  6. Anatomie pathologique
    Macroscopie Un examen macroscopique du cœur d'un patient atteint de DCMP se caractérise par une augmentation significative de sa masse, une dilatation prononcée de toutes les cavités, une pâleur et un affaissement du myocarde. La masse cardiaque est en moyenne de 600 à 800 g, atteignant dans certains cas 1 350 g (S. M. Dauletbaeva et al., 1984; A. Sacrez et al., 1985). Comme le montrent les résultats de nos recherches avec V.P. Tereshchenko (1987,
  7. Anatomie pathologique
    La dilatation locale ou l'hypertrophie est observée macroscopiquement, la cavité VG peut être de taille normale. L'affaissement du myocarde, on note une panachure du motif dans la section due à un infiltrat inflammatoire. Dans la myocardite chronique, la fibrose interstitielle est caractéristique, l'hypertrophie avec destruction des fibres musculaires, les foyers d'infiltration interstitielle mononucléée
  8. ANATOMIE PATHOLOGIQUE MODERNE DANS LA PERFECTION DU DIAGNOSTIC DE MALADIES
    La pathologie, une science qui étudie les manifestations de l'activité vitale perturbée des organismes (la science de la "souffrance", "dommage" est le sens de ce terme), a été intensément développée lorsque les manifestations cliniques de maladies ont commencé à être comparées non seulement aux résultats de l'autopsie des corps des morts, mais également aux données de l'examen microscopique organes et tissus et expérimenter. Approche clinique et anatomique de
  9. ANATOMIE PATHOLOGIQUE
    au cours de la première semaine, on observe un stade de gonflement cérébral des plaques de Peyer et des follicules solitaires dans l'intestin, des phénomènes similaires peuvent se produire dans l'oropharynx. Les ganglions trachéaux, paratrachéaux et sous-cutanés peuvent également augmenter. • La deuxième semaine, une étape de nécrose est notée. C’est une période très dangereuse, car il peut y avoir un saignement intestinal si la nécrose est profonde (entraînant une
  10. ANATOMIE PATHOLOGIQUE
    L'image la plus détaillée des changements pathologiques décrits par Pirogov. Indiquant que les muscles sont dans un état de rigor mortis prononcé, N.K. Rosenberg a décrit le syndrome de rotation du corps en raison du tonus musculaire (certains muscles sont relâchés, d'autres sont contractés). Les rides de la peau sont caractéristiques - des «blanchisseuses». La contraction musculaire convulsive conduit à la pose d’un boxeur et d’un sabreur (soulagement
  11. Anatomie pathologique
    Avec l'endocardite, le coeur est élargi, l'hypertrophie ventriculaire gauche est généralement prédominante en raison d'une insuffisance de la valve aortique. Dans le myocarde, en plus des signes d'inflammation, des lésions dystrophiques et nécrobiotiques prononcées, telles que la dystrophie basophile et parenchymateuse, ainsi que la micromalacie et les microparticules de décomposition en bloc des fibres musculaires sont révélées. Pour toutes les variantes d'endocardite infectieuse
  12. Anatomie pathologique générale
    Dystrophies parenchymateuses 1. Énumérer les signes de la dystrophie de foie gras: a) la taille du foie est réduite b) la consistance est dense c) la vue en coupe est marbrée d) la couleur de la section est jaunâtre e) le nom figuratif est «foie de muscat» Réponse correcte: d 2. Quel est le mécanisme de développement des dystrophies parenchymales : a) synthèse accrue des graisses b) formation de granules secrets c) infiltration d) synthèse accrue des protéines e)
  13. Anatomie du choc pathologique
    Le phénomène biologique complexe de «choc» est décrit en détail dans la section de physiopathologie où il est appelé conditions extrêmes. Sans entrer dans les détails, nous aborderons uniquement les aspects physiopathologiques dont nous avons besoin pour comprendre les changements pathomorphologiques qui accompagnent la réaction de choc. Les définitions du choc varient, aucune d’entre elles n’a réussi à exprimer tout son sens. Bien connu
  14. Anatomie pathologique de la cardiomyopathie hypertrophique
    Un examen macroscopique du cœur attire l’attention sur une hypertrophie significative du myocarde ventriculaire gauche en l’absence de signes morphologiques de malformations cardiaques congénitales et acquises, de DHA, d’hypertension artérielle systémique et d’autres maladies pouvant causer le développement de cette hypertrophie. De plus, l'épaisseur du ventricule gauche est souvent comprise entre 35 et 45 mm (B. Maron, 1993). À
  15. Finger M. A., Anichkov N. M .. Anatomie pathologique, 2001

  16. Finger M.A., Anichkov N.M. Anatomie pathologique, 2003

  17. Sidorova OD. Anatomie pathologique du choc, 1997

  18. Anatomie pathologique et comparaisons pathomorphologiques cliniques en paralysie cérébrale
    Il existe différents points de vue sur les relations cliniques et pathomorphologiques dans la paralysie cérébrale. M. Ourevitch Gurevich (1937) a écrit lors de l'examen des données pathologiques qu'il convenait de garder à l'esprit que, dans la plupart des cas, les enfants ne mouraient pas à un stade aigu du processus initial, le pathologiste s'occupant généralement des processus de longue durée qui se présentaient sous la forme suivante: cicatrices, kystes, porencéphalie,
  19. Taranina TS, Klimachev VV, Lepilov A.V. Tâches de test pour l'anatomie pathologique, 2009

  20. Plotnikova N.A., Kemaykin S.P., Kharitonov S.V. Anatomie pathologique générale et particulière, 2009

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