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Méthodes de semis

Le semis est une étape importante de la recherche bactériologique. Selon l'objectif de l'étude, la nature de la graine et du milieu, différentes méthodes de semis sont utilisées. Tous incluent un objectif obligatoire: protéger le semis ps des microbes étrangers. Par conséquent, vous devez travailler rapidement, mais sans mouvements brusques, renforçant les vibrations * de l'air. Vous ne pouvez pas parler pendant les récoltes. PosevM est mieux fait en boxe (lorsque vous travaillez avec du matériel infectieux, vous devez suivre les règles de sécurité personnelle).

Étapes d'isolement de la culture pure:

1er jour - obtention de colonies isolées. Le cachep du matériel d'essai est appliqué par boucle, pipette ou tige de verre à la surface de la gélose dans une boîte de Pétri. Shpa-i avec le corps frotte le matériau sur la surface du support; sans brûler et sans renverser la spatule, ils sèment le 2ème, et ainsi de suite le 3ème gobelet. Avec ce semis, la 1ère tasse a beaucoup de matière et, par conséquent, beaucoup de microbes, la 2ème est moins et la 3ème l'est encore moins.

Vous pouvez obtenir des colonies isolées lorsque vous semez une boucle. Pour ce faire, le matériau à tester est émulsifié dans un bouillon ou une solution de chlorure de sodium isotonique.

2ème jour - étudiez la croissance des microbes sur les tasses. Dans la 1ère coupe, il y a généralement une croissance continue - il ne sera pas possible d'isoler une colonie isolée. Des colonies isolées se développent à la surface de la gélose dans les 2e et 3e tasses. Ils sont étudiés à l'œil nu, à l'aide d'une loupe, avec un petit grossissement du microscope et parfois au microscope stéréoscopique. La colonie désirée est notée du côté du fond de la coupe et repiquée sur gélose fauchée. Les cultures sont placées dans un thermostat. (Seules les colonies isolées peuvent être réensemencées.)

3ème jour - étudiez la nature de la croissance sur gélose fauchée. Faites un frottis, tachez-le et assurez-vous que la culture est propre, commencez à l'étudier. Cela met fin à la sélection de la culture pure. La culture isolée et étudiée est appelée «souche».

Lorsqu'une culture pure est isolée du sang (hémoculture), elle est préalablement «cultivée» en milieu liquide: 10 à 15 ml de sang stérile sont ensemencés dans 100 à 150 ml de milieu liquide. En effet, il y a généralement peu de microbes dans le sang. Le ratio de sang inoculé et de milieu nutritif 1: 10 n'est pas accidentel - c'est ainsi que la dilution du sang est réalisée (le sang non dilué a un effet néfaste sur les micro-organismes).
Les flacons de semis sont placés dans un thermostat. Après une journée (parfois après un temps plus long, selon la culture isolée), les flacons ont été ensemencés sur des plaques pour obtenir des colonies isolées. Si nécessaire, répétez l'ensemencement avec un intervalle de 2-3 jours.

Lorsqu'une culture pure est isolée de l'urine, du lavage gastrique et d'autres liquides, ils sont pré-centrifugés dans des conditions aseptiques et le précipité est inoculé. Un isolement supplémentaire de la culture pure est effectué de la manière habituelle.

Les médias électifs sont largement utilisés pour mettre en valeur la culture pure. Dans un certain nombre de méthodes, les caractéristiques biologiques du microbe excrété sont utilisées pour obtenir des cultures pures. Par exemple, lorsque des bactéries sporulées sont isolées, les cultures sont chauffées pendant 10 minutes à 80 ° C, tuant ainsi les formes végétatives. Lorsque l'agent pathogène est isolé, il résiste aux acides et aux alcalis à l'aide de ces substances, le matériel de semence est libéré de son concomitant! la flore. Pour isoler le pneumocoque et le bacille de la peste, le matériel étudié est administré à des souris blanches - dans leur corps très sensible à ces agents pathogènes, ces micro] se multiplieraient plus rapidement que d'autres.

Dans les travaux de recherche, en particulier avec les gènes; En recherche, il est nécessaire d'obtenir des cultures en une seule cellule à partir d'une seule cellule. Une telle culture est appelée «clone».] Pour l'obtenir, ils utilisent le plus souvent un micromanipulateur - un appareil équipé de pipettes d'instruments de taille microscopique (aiguilles). A l'aide du support, sous le contrôle d'un microscope, ils sont introduits dans la préparation «goutte B», la cellule souhaitée (une) est extraite et transférée dans un milieu nutritif.

Étudier des cultures sélectionnées

L'étude de la morphologie, de la mobilité, des propriétés tinctoriales, de la nature de la croissance sur les supports (propriétés culturelles);! l'activité enzymatique et un certain nombre d'autres fonctionnalités vous! un microbe divisé vous permet de le définir taxonomiquement | certaine position, c'est-à-dire classer le micro-organisme: op | définir son sexe, son espèce, son type, son sous-type et sa variété. C'est ce qu'on appelle «l'identification». Identification des micro-organismes | Le MOV est très important dans le diagnostic des infections; les sources et les voies de sa transmission ont été établies et dans un certain nombre d'autres études scientifiques et de recherche.
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Méthodes de semis

  1. Semer des selles sur des milieux nutritifs solides
    La collecte de matériel du rectum («frottis rectal») et son inoculation sur des cadets de milieux de culture se déroulent dans la salle d'endoscopie. Pour prendre le matériau rectal, une boucle en métal bouilli avec une extrémité fondue est utilisée. Il est proposé au patient de se pencher pour étendre le pli interglutéal avec ses mains. Voyant clairement l'anus, le conservateur y introduit une boucle (à une profondeur de 3 cm). Après
  2. Hémoculture dans des milieux de culture liquides
    Sous la supervision de l'enseignant (résident), l'élève met un masque respiratoire protecteur, place le patient sur le canapé, se lave soigneusement les mains avec du savon, recueille une seringue et une aiguille stériles de 10 ml, traite la peau avec le coude avec de l'alcool, applique un garrot (manchette) sur l'épaule et fait une ponction veine ulnaire, desserre le garrot et aspire 10 ml de sang dans la seringue. Alors
  3. Clôture et culture des amygdales nasales et palatines
    Le mucus du nez et de la membrane muqueuse des amygdales de la paroi pharyngée postérieure pour examen bactériologique (isolement des agents responsables du streptocoque, infection staphylococcique, diphtérie) est élaboré par un cadet de la salle au chevet des patients souffrant d'angine de poitrine. Le cadet doit se rendre au lit du patient, emportant avec lui des tubes avec des cotons-tiges stériles sur des bâtons en bois, ainsi que des spatules et
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  9. Méthodes de recherche
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  10. Méthodes de recherche
    Les approches complexes et systémiques mises en œuvre dans cette étude avec la nature multiforme des tâches requises ont nécessité l'utilisation de diverses méthodes pour collecter des données empiriques, diagnostiquer et former la procédure pour leur traitement mathématique. Méthodes de recherche empirique: méthode d'observation et d'auto-évaluation utilisant la technologie informatique; méthodes psychodiagnostiques
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