Патологическая анатомия / Педиатрия / Патологическая физиология / Оториноларингология / Организация системы здравоохранения / Онкология / Неврология и нейрохирургия / Наследственные, генные болезни / Кожные и венерические болезни / История медицины / Инфекционные заболевания / Иммунология и аллергология / Гематология / Валеология / Интенсивная терапия, анестезиология и реанимация, первая помощь / Гигиена и санэпидконтроль / Кардиология / Ветеринария / Вирусология / Внутренние болезни / Акушерство и гинекология Parasitologie médicale / Anatomie pathologique / Pédiatrie / Physiologie pathologique / Oto - rhino - laryngologie / Organisation d'un système de santé / Oncologie / Neurologie et neurochirurgie / Héréditaire, maladies génétiques / Maladies transmises par la peau et les maladies sexuellement transmissibles / Antécédents médicaux / Maladies infectieuses / Immunologie et allergologie / Hématologie / Valeologie / Soins intensifs, anesthésiologie et soins intensifs, premiers soins / Hygiène et contrôle sanitaire et épidémiologique / Cardiologie / Médecine vétérinaire / Virologie / Médecine interne / Obstétrique et gynécologie
Accueil
À propos du projet
Actualités médicales
Pour les auteurs
Livres autorisés sur la médecine
<< Précédente Suivant >>

Milieux de culture et recherche microbiologique

La recherche microbiologique est l'isolement de cultures pures de micro-organismes, la culture et l'étude de leurs propriétés. Les cultures pures sont celles constituées de micro-organismes de la même espèce. Ils sont nécessaires dans le diagnostic des maladies infectieuses, pour déterminer l'espèce et le type de microbes, dans la recherche, pour obtenir les produits vitaux des microbes (toxines, antibiotiques, vaccins, etc.).

Pour la culture de micro-organismes (culture in vitro in vitro), des substrats spéciaux sont nécessaires - milieux nutritifs. Sur les supports, les microorganismes réalisent tous les processus de la vie (se nourrir, respirer, se multiplier, etc.), ils sont donc aussi appelés «supports de culture».

Milieux de culture

Les milieux nutritifs sont à la base du travail microbiologique et leur qualité détermine souvent les résultats de toute l'étude. Les environnements devraient créer des conditions optimales (optimales) pour la vie des microbes.

Exigences relatives aux médias

Les environnements doivent répondre aux conditions suivantes:

1) être nutritif, c'est-à-dire contenir sous une forme facilement digestible toutes les substances nécessaires pour satisfaire les besoins nutritionnels et énergétiques. Ce sont des sources d'organogènes et de substances minérales (inorganiques), y compris des oligo-éléments. Les minéraux pénètrent non seulement dans la structure cellulaire et activent les enzymes, mais déterminent également les propriétés physico-chimiques des milieux (pression osmotique, pH, etc.). Pendant la culture d'un certain nombre de micro-organismes, des facteurs de croissance - vitamines, certains acides aminés que la cellule ne peut pas synthétiser - contribuent au milieu;

Attention! Les micro-organismes, comme tous les êtres vivants, ont besoin de beaucoup d'eau.

2) ont une concentration optimale d'ions hydrogène - pH, car ce n'est qu'avec une réaction optimale du milieu affectant la perméabilité de la coquille, que les micro-organismes peuvent absorber les nutriments.

Pour la plupart des bactéries pathogènes, un environnement légèrement alcalin est optimal (pH 7,2-7,4). L'exception est le vibrion cholérique - son optimum est dans la zone alcaline

(pH 8,5-9,0) et l'agent causal de la tuberculose, nécessitant une réaction légèrement acide (pH 6,2-6,8).

Pour que lors de la croissance des micro-organismes, les produits acides ou alcalins de leur activité vitale ne modifient pas le pH, les milieux doivent avoir un tampon, c'est-à-dire contenir des substances qui neutralisent les produits métaboliques;

3) être isotonique pour une cellule microbienne, c'est-à-dire que la pression osmotique dans le milieu doit être la même qu'à l'intérieur de la cellule. Pour la plupart des micro-organismes, un environnement optimal correspondant à une solution de chlorure de sodium à 0,5% est optimal;

4) être stérile, car les microbes étrangers interfèrent avec la croissance du microbe étudié, déterminent ses propriétés et modifient les propriétés du milieu (composition, pH, etc.);

5) les environnements denses doivent être humides et avoir une consistance optimale pour les micro-organismes;

6) ont un certain potentiel redox, c'est-à-dire le rapport des substances qui envoient et reçoivent des électrons, exprimé par l'indice RH2. Ce potentiel indique une saturation en oxygène du milieu. Certains micro-organismes ont besoin d'un potentiel élevé, pour d'autres - faibles. Par exemple, les anaérobies se reproduisent à RH2 pas plus haut que 5 et les aérobies à RH2 pas plus bas que 10. Le potentiel redox de la plupart des milieux satisfait les exigences des aérobies et des anaérobies facultatifs pour cela;

7) être aussi normalisé que possible, c'est-à-dire contenir des quantités constantes d'ingrédients individuels. Ainsi, les milieux pour la culture de la plupart des bactéries pathogènes devraient contenir 0,8 à 1,2 hl d'azote aminé NH2, c'est-à-dire l'azote total des groupes amino d'acides aminés et des polypeptides inférieurs; 2,5-3,0 hl d'azote total N; 0,5% de chlorures en termes de chlorure de sodium; 1% de peptone.

Il est souhaitable que l'environnement soit transparent - il est plus pratique de surveiller la croissance des cultures, il est plus facile de remarquer la pollution de l'environnement par des micro-organismes étrangers.

Classification des environnements

Le besoin de nutriments et de propriétés environnementales de différents types de micro-organismes n'est pas le même. Cela élimine la possibilité de créer un environnement universel.
De plus, les objectifs de l'étude influencent le choix d'un support particulier.

Actuellement, un grand nombre d'environnements ont été proposés, dont la classification est basée sur les fonctionnalités suivantes.

1. Les composants source. Les composants de départ distinguent les milieux naturels et synthétiques. Les milieux naturels sont préparés à partir de produits d'origine animale et végétale. Actuellement, des environnements ont été développés dans lesquels des produits alimentaires de valeur (viande, etc.) sont remplacés par des produits non alimentaires: farine d'os et de poisson, levure fourragère, caillots sanguins, etc. Malgré le fait que la composition des milieux nutritifs des produits naturels est très compliquée et varie en fonction des à partir de matières premières, ces médias sont largement utilisés.

Les milieux synthétiques sont préparés à partir de certains composés organiques et inorganiques chimiquement purs, pris à des concentrations précises et dissous dans de l'eau distillée deux fois. Un avantage important de ces milieux est que leur composition est constante (on sait combien et quelles substances y sont incluses), donc ces milieux sont facilement reproductibles.

2. Cohérence (degré de densité). Les médiums sont liquides, denses et semi-liquides. Des milieux denses et semi-liquides sont préparés à partir de substances liquides, auxquelles de l'agar-agar ou de la gélatine sont généralement ajoutés pour obtenir un milieu de la consistance souhaitée.

L'agar-agar est un polysaccharide dérivé de certaines variétés d'algues. Ce n'est pas un nutriment pour les micro-organismes et ne sert qu'à sceller le milieu. Dans l'eau, l'agar fond à 80–100 ° С, se solidifie à 40–45 ° С.

La gélatine est une protéine animale. À 25–30 ° C, les milieux gélatineux fondent; par conséquent, les cultures sur eux sont généralement cultivées à température ambiante. La densité de ces milieux à un pH inférieur à 6,0 et supérieur à 7,0 diminue et ils ne se solidifient pas bien. Certains micro-organismes utilisent la gélatine comme nutriment - à mesure qu'ils grandissent, le milieu se liquéfie.

De plus, du sérum sanguin cohérent, des œufs enroulés, des pommes de terre et des milieux avec du gel de silice sont utilisés comme milieux denses.

3. Composition. Les environnements sont divisés en simples et complexes. Les premiers comprennent le bouillon de viande et de peptone (MPB), la gélose de viande et de peptone (MPA), le bouillon et l'agar de Hottinger, la gélatine nutritive et l'eau de peptone. Les milieux complexes sont préparés en ajoutant du sang, du sérum, des glucides et d'autres substances nécessaires à la reproduction d'un micro-organisme particulier sur des milieux simples.

4. Objectif: a) les principaux milieux (courants) sont utilisés pour la culture de la plupart des microbes pathogènes. Ce sont les MP A, MPB, bouillon et agar Hottinger susmentionnés, l'eau peptone; b) des milieux spéciaux sont utilisés pour isoler et faire croître des micro-organismes qui ne se développent pas sur des milieux simples. Par exemple, pour la culture du streptocoque, du sucre est ajouté aux milieux, pour les pneumo- et méningocoques - sérum sanguin, pour l'agent causal de la coqueluche - sang; c) les milieux électifs (sélectifs) servent à isoler un certain type de microbes, dont ils favorisent la croissance en inhibant ou en inhibant la croissance de micro-organismes apparentés. Ainsi, les sels biliaires, inhibant la croissance d'Escherichia coli, rendent l'environnement électif pour l'agent causal de la fièvre typhoïde. Les environnements deviennent électifs lorsque certains antibiotiques, sels et pH leur sont ajoutés.

Les supports électifs liquides sont appelés supports de stockage. Un exemple d'un tel milieu est l'eau peptonée avec un pH de 8,0. À ce pH, le vibrion cholérique s'y multiplie activement et les autres micro-organismes ne se développent pas; d) les environnements de diagnostic différentiel permettent de distinguer (différencier) un type de microbes d'un autre par l'activité enzymatique, par exemple, l'environnement Gies avec des glucides et un indicateur. Avec la croissance de micro-organismes qui décomposent les glucides, la couleur du milieu change; e) les milieux de conservation sont destinés à l'ensemencement primaire et au transport du matériel d'essai; ils empêchent la mort des micro-organismes pathogènes et inhibent le développement des saprophytes. Un exemple d'un tel milieu est le mélange de glycérine utilisé pour recueillir les selles dans les études menées pour détecter un certain nombre de bactéries intestinales.
<< Précédente Suivant >>
= Passer au contenu du manuel =

Milieux de culture et recherche microbiologique

  1. Etude sanitaire et microbiologique des objets environnementaux dans les institutions médicales
    Les objets d'étude lors du contrôle bactériologique des institutions médicales sont: l'air; * divers objets environnementaux; * instruments chirurgicaux; * matériel de suture; * mains de chirurgiens et peau du champ opératoire. Une étude bactériologique de la contamination microbienne des objets environnementaux implique l'identification de staphylocoques,
  2. Semer des selles sur des milieux nutritifs solides
    La collecte de matériel du rectum («frottis rectal») et son inoculation sur des cadets de milieux de culture se déroulent dans la salle d'endoscopie. Pour prendre le matériau rectal, une boucle en métal bouilli avec une extrémité fondue est utilisée. Il est proposé au patient de se pencher pour étendre le pli interglutéal avec ses mains. Voyant clairement l'anus, le conservateur y introduit une boucle (à une profondeur de 3 cm). Après
  3. Hémoculture dans des milieux de culture liquides
    Sous la supervision de l'enseignant (résident), l'élève met un masque respiratoire protecteur, place le patient sur le canapé, se lave soigneusement les mains avec du savon, recueille une seringue et une aiguille stériles de 10 ml, traite la peau avec le coude avec de l'alcool, applique un garrot (manchette) sur l'épaule et fait une ponction veine ulnaire, desserre le garrot et aspire 10 ml de sang dans la seringue. Alors
  4. Examen microbiologique
    Les études épidémiologiques discutées ci-dessus visent principalement à identifier l'agent pathogène responsable de la sclérose en plaques. Cependant, jusqu'à présent, aucun agent pathogène n'a été détecté. Des agents pathogènes distincts ont été trouvés dans le cerveau de patients décédés atteints de sclérose en plaques, mais aucun agent pathogène n'était présent dans le corps de tous les patients. Récemment été
  5. Collecte de matériel microbiologique
    Dans les cas où l'on soupçonne que la mort est due à une maladie infectieuse, il est nécessaire de prendre du matériel pour la recherche microbiologique. La séquence d'ouverture des cavités et des organes du cadavre dans de tels cas varie quelque peu: la section commence par les zones du corps où le matériau doit être prélevé pour éviter la contamination du champ de la section et retirer le matériau dans le plus stérile
  6. Etudes sanitaires et microbiologiques
    Sanitaire et microbiologique
  7. Recherche sanitaire et microbiologique de l'eau
    Recherche sanitaire et microbiologique
  8. Instructions pour prendre le matériel d'essai pour la recherche microbiologique
    Sang Le sang d'un patient est prélevé par une infirmière et un assistant de laboratoire dans la salle de traitement ou dans le service, selon l'état du patient. Il est recommandé de prélever du sang pour l'ensemencement dans la mesure du possible avant le début de l'antibiothérapie ou 12 à 24 heures après la dernière injection du médicament au patient. Le semis est effectué lors d'une montée en température. Il est recommandé de prendre du sang 2 à 4 fois par jour, avec une septicémie aiguë - 2-3
  9. Livraison de matériel au laboratoire de diagnostic clinique pour des études immunologiques et microbiologiques
    Règles pour la préparation des sujets, la prise et le stockage et la livraison de matériel pour la recherche en CDL Études immunologiques Pour étudier le système immunitaire de l'organisme, le sang veineux (plasma, sérum, globules: globules rouges, globules blancs, lymphocytes), le sang capillaire et les fluides biologiques sont utilisés: urine , salive, bile, lait, etc. Sang veineux
  10. L'étude du rinçage à la surface de divers objets environnementaux
    La méthode de Padchenko et al. (1985). Le rinçage de la surface des articles ménagers, des environnements domestiques ou industriels (jouets, pots de bébé, poignées de porte, vaisselle, etc.), ainsi que des mains du personnel de service, des enfants et des autres personnes suspectées d'avoir des infestations de protozoaires, produit 0,85% une solution aqueuse de chlorure de sodium avec un coton-tige ou une brosse. L'échantillon est versé dans un grand cylindre
  11. Analyse microbiologique
    Le poisson en conserve doit être industriellement stérile. La stérilité industrielle des aliments en conserve signifie l'absence dans les produits de micro-organismes capables de se développer aux températures de stockage établies pour ce type d'aliments en conserve et l'absence dans les aliments en conserve de toxines microbiennes et de micro-organismes dangereux pour la santé des consommateurs. Dans les cas où la stérilité est altérée, les aliments en conserve ne sont pas vendus
  12. Position des micronutriments
    La prévalence de quatre carences en micronutriments est décrite ici: l'iode, le fer et les vitamines A et D. Celles-ci sont discutées plus en détail dans les chapitres 4-6. Iode La détermination de la carence en iode légère, modérée et sévère (tableau 3) est basée sur une évaluation combinée de quatre indicateurs différents: le goitre chez les écoliers, une augmentation du volume de la glande thyroïde
  13. Soutien nutritionnel pour certaines maladies
    Le cancer PPP augmente le poids corporel et améliore l'état nutritionnel de nombreux patients cancéreux; cependant, comment cela affecte la survie n'a pas encore été démontré. Les neurotransmetteurs cataboliques (par exemple, le facteur de nécrose tumorale) libérés en réponse à de nombreuses tumeurs ternissent souvent les résultats anaboliques du SPT. L'augmentation de la teneur en protéines chez les patients cancéreux n'est pas aussi rapide que chez d'autres
  14. Intolérance aux nutriments
    Un facteur important, parfois déterminant, dans le choix du schéma PP est l'intolérance à l'un ou l'autre substrat. Les principaux indicateurs de laboratoire de l'intolérance sont le glucose sérique, l'azote uréique et les triglycérides. Avec une intolérance aux glucides, le taux de glucose dans le sérum sanguin augmente. Si l'osmolarité plasmatique est augmentée de manière significative, cette condition entraîne
  15. Diagnostic de carence nutritionnelle
    Une étape importante dans la nomination d'un soutien nutritionnel est l'évaluation de l'état nutritionnel. L'efficacité du traitement et le pronostic de la maladie dépendent du degré d'énergie, de protéines, d'eau-électrolyte, de soutien vitaminique du corps. Hippocrate a également noté qu'un régime alimentaire maigre et inadéquat peut aggraver l'état du patient dans les maladies aiguës et chroniques. Au cœur de l'alphabétisation
  16. PRINCIPES GÉNÉRAUX DE CONTRÔLE MICROBIOLOGIQUE ET SANITAIRE-HYGIÉNIQUE DANS L'INDUSTRIE ALIMENTAIRE
    Le contrôle microbiologique a pour tâche de détecter et d'identifier rapidement les voies de pénétration des micro-organismes nuisibles dans la production, les foyers et leur degré de reproduction à certaines étapes du processus technologique; prévenir le développement de la microflore étrangère grâce à l'utilisation de diverses mesures préventives; destruction active par désinfection pour obtenir
Portail médical "MedguideBook" © 2014-2019
info@medicine-guidebook.com