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Partie pratique

Préparation pour stériliser la verrerie de laboratoire

1. Avant la stérilisation, la verrerie de laboratoire est soigneusement lavée et séchée.

2. Les tubes à essai, bouteilles, bouteilles, matelas, flacons sont fermés avec des bouchons en gaze de coton. Sur le bouchon de chaque récipient (sauf les tubes à essai), placez un capuchon en papier.

3. Boîtes de Petri stérilisées emballées dans du papier pour 1 à 5 pièces ou dans des étuis à crayons.

4. Les pipettes Pasteur de 3-5-10-15 pièces sont emballées dans du papier brun épais. Un morceau de coton est placé en haut de chaque pipette. Pendant le fonctionnement, les pipettes du sac sont retirées à l'extrémité supérieure.

La verrerie de laboratoire est stérilisée:

a) chaleur sèche à une température de 150, 160 et 180 ° C, respectivement, 2 heures, 1 heure et 30 minutes.

b) dans un autoclave à une pression de 1 atm. dans les 20-30 minutes.

Stérilisation d'instruments métalliques

Les ciseaux, scalpels, pincettes, etc. sont stérilisés dans une solution de soude à 2% (la soude empêche la rouille et la perte de netteté). Il est recommandé d'envelopper les lames de scalpels et de ciseaux avant l'immersion dans l'eau avec du coton.

Stérilisation des gants et autres produits en caoutchouc

Les gants, les tuyaux, les tubes et autres contaminés par la forme végétative des microbes sont stérilisés par ébullition dans une solution de soude à 2% ou de vapeur fluide pendant 30 minutes; lorsqu'il est contaminé par une microflore pathogène sporulée - dans un autoclave à une pression de 1 atm. dans les 30 minutes.

Préparation de désinfectants au chlore

1. La chaux chlorée a un effet bactérien élevé. Il est utilisé en pratique microbiologique sous forme de poudre, 10-20% de chlore-lait de chaux et 0,2-10% d'une solution clarifiée.

2. Schéma de préparation du chlore-lait de chaux.

La concentration de lait chlore-nzvstskogo (en%)

La quantité d'eau de Javel en grammes pour 10 l d'eau contenant le chlore actif (en%)

Le tableau montre la relation entre la teneur en chlore actif dans l'eau de Javel et sa quantité nécessaire pour la préparation de 10 l de chlore-lait à 10-20% de concentration.

3. Chloramine - contient 25-26,5% de chlore actif.

Les laboratoires de microbiologie utilisent des solutions de chloramine à 0,2-10%.

La concentration de la solution (en%)

La quantité de chloramine dans 1 g par:

Préparation d'une solution mère d'agent de blanchiment

1. Prenez un récipient (bouteilles en verre de verre foncé avec bouchon moulu, émaillé ou verrerie) et placez-y 1 kg d'eau de Javel sèche, après quoi, en remuant, ajoutez progressivement une petite quantité d'eau jusqu'à l'obtention d'une pulpe. Et puis, en remuant, ajoutez de l'eau à un volume de 10 litres, c'est-à-dire pour préparer une solution à 10% d'eau de Javel, vous devez prendre: 1 kg d'eau de Javel sèche + 9 litres d'eau = = 10 litres de solution.

2. Les solutions fraîchement préparées sont laissées pendant 24 heures dans un endroit sombre et frais dans un récipient scellé. Après 24 heures, avec précaution, sans agiter le précipité, la solution clarifiée est versée dans un autre récipient (récipients en verre de couleur foncée, plats émaillés ou en plastique) pour une conservation jusqu'à 10 jours.

3. Lors de la préparation de la liqueur mère sur le récipient (sur l'étiquette qui y est attachée), la date de préparation, la concentration de la solution, la position, le nom de la personne qui a préparé la solution est indiquée.

Attention! L'utilisation de plats galvanisés est interdite. Désinfectants du groupe des phénols

1. Acide carbolique. L'acide carbolique liquide contient 90% de phénol cristallin et 10% d'eau. Dans les laboratoires de microbiologie, 3 à 5% de solutions d'acide carbolique sont utilisées.

Schéma de préparation de solutions d'acide carbolique

2. Mélange de chrome. Cuisson sur ordonnance:

150 ml d'acide sulfurique concentré sont versés dans le ballon, 25 g de dichromate de potassium y sont ajoutés. Le mélange résultant a été laissé au repos jusqu'à dissolution. Après une journée, une solution orange foncé peut être utilisée pour laver la vaisselle. Avant utilisation, le mélange doit être chauffé à 45-50 ° C. Si la couleur du mélange passe au vert foncé, cela indique son inadéquation.

Isolement du bactériophage du matériel pathologique

Le liquide d'essai est filtré des germes.

Le matériau d'essai solide (terre, produits alimentaires, selles formées) est broyé dans un mortier, émulsionné, filtré. La présence de phage dans le filtrat obtenu est déterminée en milieu nutritif liquide ou en milieu solide selon la méthode d'Otto ou de Grazia.

Détection Otto de bactériophages en milieu solide

1,5% de MPA est versé dans des boîtes de Pétri (une concentration plus élevée de gélose inhibe le développement de colonies de bactériophages). Après la gélification, le MPA est ensemencé avec une culture en bouillon de 16 à 18 heures de bactéries homologues au phage souhaité. Pour obtenir une croissance continue, le semis est broyé avec une spatule. 5 à 10 minutes après le semis, le filtrat étudié est appliqué goutte à goutte sur la surface séchée. Les tasses sont placées dans un thermostat pendant 18-24 heures à une température de 37 ° C.

Aucun résultat: la preuve de la présence d'un bactériophage est l'absence totale de croissance de la culture au site d'une goutte de filtrat (bactériophage actif) ou l'apparition de petites taches-colonies stériles d'un bactériophage (bactériophage de faible activité) à cet endroit.

La technique des microbes bassonistes selon la méthode de Cregie et Jensen

Le phagotypage est basé sur le principe de la co-culture d'une culture typée avec un bactériophage typique. Le début de la lyse détermine le type de bactérie. Pour les bactéries phagotypeuses, 1,5% de MPA avec 5% de glycérol est utilisé. Des gouttes de culture de bouillon germé sont appliquées à la surface du milieu nutritif. Les gouttes ne devraient pas se propager. Ils doivent être absorbés pendant 3 à 10 minutes.

Ensuite, 1 goutte d'un phage typique est appliquée à la surface de chaque goutte afin qu'une partie de la culture reste exempte des effets du bactériophage (pour contrôler la croissance de la culture). Les tasses sont placées dans un thermostat à une température de 37 ° C: après 6-8 heures, les résultats du phagotypage sont enregistrés.

La présence d'une lyse prononcée de la culture étudiée avec l'un des phages typiques indique que la culture appartient à ce phagotype.

Annexe 7.4 (informative)

SP 1.2.731—99

Moyens et méthodes de désinfection utilisés pour travailler avec des micro-organismes des groupes de pathogénicité III - IV

I. Bactéries non sporulées

1. Chloramine B ou CB (teneur en chlore actif - AH d'au moins 26%):

Solutions à 0,5%, 1%, 2%, 3% (selon le médicament).

2. Chaux chlorée (teneur en AX d'au moins 25%):

matière sèche;

0,5%, 1%, 2% (selon la préparation) des solutions clarifiées;

10% (selon la préparation) des solutions clarifiées et non clarifiées;

20% (selon la préparation) de lait de chlore-chaux.

3. Chaux de blanchiment résistante à la chaleur (teneur en AX d'au moins 25%):

matière sèche;

0,5%, 1%, 2% (selon la préparation) des solutions clarifiées;

10% (selon la préparation) des solutions clarifiées et non clarifiées.

4. Hypochlorite de calcium neutre - NGK (teneur en AX d'au moins 52% pour le grade A et d'au moins 24% pour le grade B):

matière sèche;

Solution à 0,15% (par AX);

Solutions clarifiées à 0,25%, 0,5%, 1% (par AXE);

5% (selon la préparation) des solutions clarifiées et non clarifiées.

5. Hypochlorite de calcium technique - GCT (teneur en AX d'au moins 35%):

matière sèche;

1%, 1,5% (selon la préparation) des solutions clarifiées;

5% (selon la préparation) des solutions clarifiées et non clarifiées.

6. Le sel à deux bases de l'hypochlorite de calcium - DTS HA (teneur en AX d'au moins 47%):

matière sèche;

0,25%, 0,5%, 1% (selon la préparation) des solutions clarifiées;

5% (selon la préparation) des solutions clarifiées et non clarifiées.

7. Le sel dibasique d'hypochlorite de calcium - DSGK (teneur en AX d'au moins 30%):

matière sèche;

Solution clarifiée à 1% (selon la préparation);

5% (selon la préparation) des solutions clarifiées et non clarifiées.

8. Hypochlorite de sodium (teneur en AX d'au moins 14%):

Solution à 1% (par AX).

9. Hypochlorite de sodium, obtenu par électrolyse du chlorure de sodium dans les usines autorisées pour la production et l'utilisation de solutions à 0,125%, 0,25% (par AX).

10. Anolytes obtenus dans des installations autorisées pour la production et l'utilisation:

avec une teneur de 0,03%, 0,05%, 0,06% AH.

11. Sporox (teneur en AX d'au moins 2,5%):

2%, 5% (selon le médicament) des solutions.

12. DP-2 (teneur en AX d'au moins 40%)

0,1%, 0,2% (selon le médicament) des solutions. 13. Deoxon-1 ou Deoxon-4 (teneur en acide peracétique - NU K au moins 5%):

Solutions à 1%, 2% (selon le médicament).

14.
Perhydrol (teneur en peroxyde d'hydrogène 30-35%):

Solution de peroxyde d'hydrogène à 3% (DV);

Solution de peroxyde d'hydrogène à 3% (DV) avec 0,5% de détergent ("Progress", "News", "Astra", "Lotus");

Solution de peroxyde d'hydrogène à 6% (DV).

15. PVC (teneur en peroxyde d'hydrogène non inférieure à 30%):

Solutions à 0,5%, 0,75%, 2% (peroxyde d'hydrogène).

16. Peroximède (teneur en peroxyde d'hydrogène 30% et tensioactif):

Solution à 3% (peroxyde d'hydrogène).

17. Peroxohydrate de fluorure de potassium - PFK-1 (teneur en peroxyde d'hydrogène d'au moins 30%):

Solutions à 3%, 6%, 7%, 9% (selon le médicament).

18. Polysept (teneur en polyhexaméthylène guanidine 25%):

Solution à 1% (selon le médicament).

19. Démos (contenant un complexe de tensioactifs cationiques et autres):

5%, 10% (selon le médicament) des solutions.

20. Veltolen (teneur en clathrate d'urée avec 20% de bromure de didécyldi-méthylammonium):

Solution à 1% (selon le médicament).

21. Fogucid (teneur en sexe et phosphate d'hexaméthylène guanidine 19-25%):

Solutions 0,5-1% (sur DV).

22. Nika-extra M (teneur en chlorure d'alkyldiméthylbenzylammonium 3,5-4,5%):

0,5%, 2% (selon le médicament) des solutions.

23. Lysol A (50% de phénol):

Solution à 5% (selon le médicament).

24. 1-chloro-r-naphtol:

0,5%, 2% (selon le médicament) des solutions.

25. Soude caustique:

Solution à 10% (selon le médicament).

26. Alaminol (contient de la catamine AB, du glyoxal, etc.):

Solution à 1% (selon le médicament).

27. Bianol (contient du glutaraldéhyde, du glyoxal et de la catamine AB):

Solution à 1,5% (selon le médicament).

28. Glutaral ou Glutaral N (teneur en glutaraldéhyde 2%):

produit prêt à l'emploi.

29. Formol:

Solutions aqueuses à 3%, 10%, 20%, 40% (formaldéhyde).

30. Solution aqueuse d'ammoniaque à 25% (DV).

Pour neutraliser le formaldéhyde, un rapport de 1: 1 est utilisé.

31. Dichlor-1, Protéine, Gloss, Gloss-2, Sanita, Dezus et autres produits de nettoyage et de désinfection ménagers: pâtes, poudres et autres formes.

32. Ébullition:

Solution de bicarbonate de soude à 2%;

Solution à 2% de carbonate de sodium.

33. Traitement de la vapeur d'eau saturée sous pression (autoclavage).

34. Alcool éthylique 70%, 96%, un mélange de Nikiforov.

35. Traitement à l'air chaud - 180 ° C.

36. Brûlure.

37. Calcination.

38. Traitement dans les chambres de désinfection: méthodes vapeur-air, vapeur-formol.

39. Méthode de désinfection par aérosol.

40. Méthode au gaz (désinfection à la vapeur de formaldéhyde).

41. Rayonnement ultraviolet.

II. Mycobactéries

1. Chloramine B ou HB (teneur en AX d'au moins 26%):

Solution à 5% (selon le médicament);

Solutions activées à 0,5% et 1% (par AX).

2. Chaux chlorée (teneur en AX d'au moins 25%):

matière sèche;

2-10% (selon le médicament) des solutions;

20% (selon la préparation) de lait de chlore-chaux;

0,25 0,5% (par AX) des solutions activées.

3. Chaux de blanchiment résistante à la chaleur (teneur en AX d'au moins 25%):

matière sèche;

2-10% (selon le médicament) des solutions;

0,25-0,5% (par AX) des solutions activées.

4. Le sel à deux bases de l'hypochlorite de calcium - DTS GK (teneur en AX d'au moins 47%):

matière sèche;

20% de lait de javel;

Solution à 1% (selon le médicament).

5. Sel dibasique d'hypochlorite de calcium - DSGK (teneur en AX d'au moins 30%):

matière sèche.

6. Hypochlorite de calcium neutre - NGK (teneur en AX d'au moins 52% pour le grade A et d'au moins 24% pour le grade B):

matière sèche;

Solution à 1%, 5% (selon AX).

7. Hypochlorite de calcium technique - GCT (teneur en AX d'au moins 35%):

matière sèche;

Solution à 2% (selon le médicament).

8. Hypochlorite de sodium obtenu par électrolyse dans des usines autorisées pour la production et l'utilisation:

Solutions à 0,25%, 0,5% (par AXE).

9. Anolytes obtenus dans des installations autorisées pour la production et l'utilisation avec une teneur de 0,05,09,09% AH.

10. Sporox (teneur en AX d'au moins 2,5%):

Solution à 10% (selon le médicament).

11. DP-2 (teneur en AX d'au moins 35%):

matière sèche;

Solution à 0,5% (selon le médicament).

12. Deoxon-1 ou Deoxon-4 (teneur en acide peracétique - NAA d'au moins 5%):

Solutions à 0,25%, 0,5%, 1% (selon NUK).

13. Perhydrol (teneur en peroxyde d'hydrogène - PV - pas moins de 30%):

Solution à 3%.

14. Peroximed (teneur en PV d'au moins 30% et composants détergents):

Solutions à 3 et 4% (en PV).

15. PVC (teneur en PV d'au moins 30%):

Solution à 2,5% (en PV).

16. Marque Lysol A (teneur en phénol 50%):

Solution à 5%.

17. 1-chloro-r-naphtol:

Solution à 0,5% (selon le médicament).

18. Glutaral ou Glutaral N (teneur en glutaraldéhyde 2%):

produit prêt à l'emploi.

19. Alaminol (contient de la catamine AB, du glyoxal, etc.):

Solution à 1% (selon le médicament).

20. Bianol (contient du glutaraldéhyde, du glyoxal et de la catamine AB):

Solution à 1,5% (selon le médicament).

21. Ébullition:

Solution de bicarbonate de soude à 2%;

Solution à 2% de carbonate de sodium.

22. Traitement de la vapeur d'eau saturée.

23. Traitement à l'air chaud - 180 ° C

24. La brûlure.

25. Recuit.

26. Traitement en chambre de désinfection: méthodes vapeur-air, vapeur-formol.

27. Rayonnement ultraviolet.

C. Bactéries sporulées

1. Chloramine B ou HB (teneur en AX d'au moins 26%):

1-4% de solutions activées contenant 0,25-1% d'AH.

2. Chaux chlorée ou chaux blanchissante résistante à la chaleur (teneur en AX d'au moins 25%):

matière sèche;

20% de solution clarifiée et non clarifiée contenant au moins 5% d'AH;

Solution activée clarifiée à 4% contenant au moins 1% d'AH.

3. Hypochlorite de calcium neutre - NGC (teneur en AX d'au moins 52%):

matière sèche;

Solution clarifiée à 15% contenant au moins 5% d'AH;

Solution activée clarifiée à 2% contenant au moins 1% d'AH.

4. Le sel à deux bases de l'hypochlorite de calcium - DTS, HA (teneur en AX d'au moins 47%):

matière sèche;

Solution clarifiée à 15% contenant au moins 5% d'AH;

Solution activée clarifiée à 2% contenant au moins 1% d'AH.

5. Sel dibasique d'hypochlorite de calcium - DSGK (teneur en AX d'au moins 30%):

matière sèche;

Solution activée à 4% contenant au moins 1,2% d'AH.

6. Soude caustique:

Solution à 10% (70 ° C).

7. Perhydrol contenant 30 à 35% de peroxyde d'hydrogène (PV):

6% de solution PV avec 0,5% de détergent ("Progress", "News", "Astra", "Lotus");

Solution PV à 3% avec 0,5% de détergent à une température de solution de 50 ° C.

8. PVC (teneur en PV d'au moins 30%):

une solution contenant 4% de PV à une température de 20 ° C; une solution contenant 3% de PV à une température de 50 ° C.

9. Peroximed (teneur en PV 30% et tensioactif):

Solution à 3% (selon PV) à une température de 20 et 50 ° C;

Solution à 6% (PV).

10. Déoxon-1 ou déoxon-4 (la teneur en PUA n'est pas inférieure à une solution contenant 1% d'acide peracétique (NU K).

11. Formol:

Solutions aqueuses à 20%, 40% (formaldéhyde);

0, solution à 2% de formaldéhyde avec 0,2% de savon ou OP-10 à une température de 60 ° C.

12. Ébullition.

13. Recuit.

14. La brûlure.

15. Air chaud sec.

16. Traitement à la vapeur sous pression.

17. Tous les conteneurs dans lesquels la désinfection est effectuée doivent être recouverts d'un couvercle.

18. Traitement en chambre: nouvelles méthodes vapeur-air et vapeur-formelle-1.

19. Méthode de désinfection par aérosol.

QUESTIONS POUR L'AUTO-CONTRÔLE

Quels facteurs physiques affectent la cellule? Que sont les «antiseptiques» et «l'asepsie»? Quels «antiseptiques» connaissez-vous? Que sont la «symbiose», la «métabiose» et «l'antagonisme»? Qu'est-ce que la stérilisation? Quelles sont les méthodes physiques de stérilisation? Où la stérilisation chimique et mécanique est-elle utilisée?

Qu'est-ce qu'un bactériophage? La structure et la morphologie des phages. Comment les phages sont-ils utilisés en médecine?
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Partie pratique

  1. Partie pratique
    Pratique
  2. Partie pratique
    Formulation de la réaction d'agglutination sur verre et dans des tubes à essai Dans toutes les réactions immunologiques, le composant principal est un antigène qui a deux propriétés: 1) la capacité de provoquer un processus immunologique dans le corps; 2) la capacité de se lier aux anticorps dans les réactions sérologiques. La réaction d'un anticorps avec un antigène est appelée sérologique (du lat. Sérum -
  3. Partie pratique
    Principes de base et étapes de la recherche bactériologique 1. Choix qualifié du matériel à étudier: pour les échantillons cliniques - en tenant compte de la nature et de la localisation du processus pathologique, de la pathogenèse de la maladie et de son stade; pour les objets environnementaux - en tenant compte de leur valeur possible en tant que voies et facteurs de transmission des micro-organismes - agents pathogènes des infections. 2.
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    Technique de collecte du matériel d'un patient pour la recherche bactériologique Le choix du matériel pour la recherche en laboratoire est déterminé par la localisation du processus pathologique, les caractéristiques de la pathogenèse de la maladie et les propriétés biologiques du pathogène. Le succès de la recherche bactériologique dépend de l'exactitude de l'échantillonnage du matériel. Matériel pathologique pour la recherche bactériologique
  5. PARTIE PRATIQUE
    Prélever un échantillon d'air dans la salle de formation en utilisant la méthode de sédimentation. 2. Prélever un échantillon d'air dans la salle d'entraînement en utilisant une méthode d'aspiration (appareil de Krotov). 3. Déterminer le nombre microbien total dans 1 m3 d'air (utiliser des plaques pré-préparées avec des colonies cultivées). 4. Etudier les propriétés tinctoriales et enzymatiques des colonies cultivées. 5. Résolvez le problème: pour 10
  6. PARTIE PRATIQUE
    Réaliser un prélèvement d'eau du robinet conformément à toutes les règles de la recherche bactériologique. 2. Semez 1 ml d'eau de chaque échantillon dans des boîtes de Pétri stériles avec de la gélose nutritive fondue pour déterminer le nombre total de microbes. 3. Compter les colonies cultivées sur les plaques (pré-préparées) et exprimer le résultat en unités formant colonie (UFC). 4.
  7. PARTIE PRATIQUE
    Préparez un échantillon de sol pour la recherche bactériologique. 2. Pour faire une dilution du sol de 1:10 et une série de dilutions en série de 1: 100; 1: 1000; 1: 10000. 3. Déterminer les bactéries du groupe d'Escherichia coli dans le sol par la méthode de titrage. 4. Определение микробного числа почвы: пользуясь демонpaHHOHHbiMH посевами на МПА различных разведений почвенной суспензии, подсчитать микробное
  8. ПРАКТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ
    Произвести отбор пищевых продуктов (по заданию преподавателя). 2. Подготовить пробу к бактериологическому исследованию. 3. Произвести отбор проб пищевых продуктов для бактериологического исследования. 4. Приготовить ватные тампоны для взятия смывов. 5. Взять смывы с рук до обработки и после мытья. Произвести посев на среду Эндо, глубинным методом на МПА. 6. Произвести посевы
  9. Практическая часть
    Практическая
  10. Conférences. Житейская и научная практическая психология. Часть 1, 2011
    Виды психологических знаний. Классификация наук. Критерии психологии как науки. Место психологии в системе наук. Наука. Основные функции науки. Основные этапы становления психологии как науки. Особенности психологической науки. Отличие научного познания от других видов познания. Отрасли психологии. Соотношение научной и житейской психологии. Сравнение научной и житейской психологии.
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