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Partie pratique

Formulation de la réaction d'agglutination sur verre et tubes à essai

Dans toutes les réactions immunologiques, le composant principal est l'antigène, qui a deux propriétés:

1) la capacité de provoquer un processus immunologique dans le corps;

2) la capacité de se lier aux anticorps dans les réactions sérologiques.

La réaction d'un anticorps avec un antigène est appelée sérologique (du lat. Sérum - sérum). Les réactions sérologiques utilisent:

1) pour la détection dans le sérum sanguin d'anticorps dirigés contre un microbe particulier à l'aide d'un antigène spécifique connu;

2) établir le type ou le type du microbe isolé par sa structure antigénique à l'aide de sérum de diagnostic contenant des anticorps spécifiques connus.

Vaisselle et équipement pour la production de réactions sérologiques

Vaisselle:

1) tubes chimiques et à centrifuger;

2) flacons Erlenmeyer à fond plat;

3) Pipettes Pasteur d'un volume de 10 et 5 ml avec divisions de 0,1 ml;

4) cylindres gradués.

La vaisselle doit être propre et sèche. Pour son traitement, vous ne pouvez pas utiliser de désinfectants (acide phénique, chloramine), acides et alcalis. Les plats sont bouillis dans de l'eau plate. La stérilisation des plats sérologiques n'est pas nécessaire.

Matériel:

1. Trépieds avec prises.

2. Thermostat et bain-marie avec régulateurs de température.

3. Centrifuger de 2000 à 3000 tr / min.

4. Agglutinoscope.

Réaction d'agglutination (RA)

L'agglutination est le collage détecté par l'œil nu et les sédiments des corps microbiens lorsqu'ils interagissent avec des anticorps spécifiques.

La PR est largement utilisée dans la pratique microbiologique pour le diagnostic de:

1) fièvre typhoïde;

2) paratyphoïde A et B (réaction de Widal);

3) le typhus;

4) brucellose (réaction de Wright);

5) tularémie, etc.

Formulation d'une réaction d'agglutination détaillée de manière volumétrique.

1) sérum sanguin à tester, 0,1-0,2 ml;

2) solution saline;

3) antigène corpusculaire: suspension d'une culture vivante de microbes de 20 heures.

Seules les cultures en forme de S sont utilisées (colonies lisses et brillantes avec des bords réguliers).

Préparation des dilutions de sérum patient:

Une série de dilutions en série sont préparées à partir de sérum, de 1: 50-1: 100 à 1: 1600-1: 3200. Dans un tube séparé, la première dilution de sérum 1:50 ou 1: 100 est préparée. Pour cela, 0,1 ml de sérum est ajouté avec une pipette graduée, 4,9 ml (1:50) ou 9,9 ml (1: 100) de sérum physiologique y sont ajoutés avec une autre pipette. Une solution mère de sérum est utilisée pour préparer des dilutions doubles en série. A la fin des dilutions, 2 à 3 gouttes d'antigène sont ajoutées à tous les tubes de la série (sauf le contrôle). Les tubes sont agités et placés pendant 2 heures dans un thermostat à une température de 37 ° C. Tenez ensuite compte du résultat préliminaire de la réaction. Le résultat final de la réaction d'agglutination est enregistré après 18-20 heures de repos des tubes à température ambiante.

Un résultat positif de la réaction d'agglutination est caractérisé par la formation de sédiments au fond du tube avec une clarification prononcée du surnageant.

Le précipité au fond du tube, formé par collage de corps microbiens, est appelé agglutinat.

Pour enregistrer les résultats de la réaction d'agglutination, un système de désignation à quatre croix est utilisé: + + + n - agglutination complète, dans laquelle un gros sédiment au fond est situé en tas ou sous la forme d'un parapluie inversé ouvert. Le surnageant est clair; + + + - agglutination presque complète, le précipité est le même, le surnageant est presque transparent; + + - faible agglutination, le précipité est à peine perceptible, le liquide est opaque; + - des traces d'agglutination sont notées;

- réaction négative, le contenu du tube est uniformément trouble.

La dernière dilution sérique dans laquelle une agglutination est observée est considérée comme son titre.

La réaction d'agglutination sur verre

Cette réaction est considérée comme indicative. Il est souvent utilisé pour déterminer le type de microbe.

1. Sur la surface d'une lame de verre dégraissée, 2 gouttes de sérum d'agglutination sont appliquées à l'aide d'une pipette Pasteur.

2. La culture bactérienne d'essai, prélevée à la surface d'un milieu nutritif dense, est introduite dans le sérum.

3. La culture introduite est soigneusement mélangée. La réaction se déroule à température ambiante.
Le résultat est pris en compte avec une loupe après 5-10 minutes.

Avec une réaction positive dans la goutte, on note la mise à la terre des bactéries sous forme de grains ou de flocons.

Facteurs de résistance naturelle du corps. Méthodes de leur étude. Phagocytose

Chez l'homme et les animaux supérieurs, les cellules du système réticulo-endothélial possèdent la capacité phagocytaire: leucocytes de sang et de lymphe, cellules Kupffer fixes du foie, cellules réticulaires de la rate, moelle osseuse, ganglions lymphatiques, histiocytes du tissu conjonctif lâche.

Dans la lutte contre les microbes pathogènes, les leucocytes jouent un rôle important. Le sort des micro-organismes capturés par les globules blancs peut avoir trois conséquences:

1) digestion intracellulaire complète des microbes, entraînant leur disparition dans les leucocytes, phagocytose complète;

2) l'expulsion des microbes des globules blancs dans l'environnement;

3) reproduction active des microbes à l'intérieur des leucocytes, - phagocytose incomplète.

Dans ce dernier cas, la phagocytose acquiert une valeur négative pour l'organisme, car les microbes situés à l'intérieur des cellules deviennent moins accessibles à l'action des anticorps. Une phagocytose incomplète survient avec la tuberculose, la brucellose, la tularémie, la gonorrhée.

L'idée de la capacité phagocytaire des leucocytes sanguins peut être obtenue à partir de l'activité phagocytaire des leucocytes.

Détermination de l'activité phagocytaire des leucocytes

L'activité phagocytaire des leucocytes est exprimée en pourcentage de leucocytes actifs (phagocytes) par rapport au nombre total de leucocytes neutrophiles comptés.

0,2 ml de citrate de sodium à 2% est versé dans un tube à centrifuger stérile, 0,1 ml de sang d'essai prélevé sur un doigt et 0,05 ml de suspension microbienne sont ajoutés. Le tube est agité doucement, placé pendant 30 min dans un thermostat à une température de 37 ° C. Ensuite, le mélange est centrifugé à 2000–3000 tr / min jusqu'à ce que le liquide soit stratifié dans la couche supérieure de plasma transparent jaune paille, la couche inférieure de globules rouges et le film d'argent moyen entre eux, la couche de globules blancs. Tout d'abord, la couche supérieure est aspirée avec une pipette Pasteur, puis la couche intermédiaire est retirée très soigneusement, 3-5 frottis sont fabriqués et colorés.

La microscopie d'un frottis compte le nombre de leucocytes neutrophiles phagocytés à partir du nombre total de leucocytes comptés. Pour obtenir des résultats fiables, le nombre de ces derniers doit être d'au moins 100. Le résultat obtenu est exprimé en pourcentage.

Choc anaphylactique

1. Informations permettant à un professionnel de la santé de soupçonner un choc anaphylactique:

1.1. Sur le fond ou immédiatement après l'administration du médicament, du sérum, une piqûre d'insecte, etc., une faiblesse, des étourdissements, un essoufflement, une sensation de manque d'air, de l'anxiété, une sensation de chaleur dans tout le corps, parfois des vomissements sont apparus.

1.2. La peau est pâle, froide, humide, la respiration est fréquente, peu profonde. Pression systolique 90 mm RT. Art. ou moins. Dans les cas graves, inhibition de la création et de la respiration. 2. Tactiques d'un professionnel de la santé

ACTION

JUSTIFICATION

1. Appelez un médecin

2. Si un choc anaphylactique s'est développé lors de l'administration intraveineuse d'un médicament, alors:

1. Arrêtez l'administration du médicament, maintenez l'accès veineux

Réduction de la dose d'allergène

2. Donnez une position latérale stable, retirez les prothèses dentaires

Prévention de l'asphyxie

3. Soulevez le pied du lit.

Améliorer l'apport sanguin au cerveau

4. Donnez 100% d'oxygène humidifié.

Réduction de l'hypoxie

5. Mesurer la pression artérielle et la fréquence cardiaque

Surveillance de l'état

3. Avec injection intramusculaire:

1. Arrêtez d'administrer le médicament

Ralentir l'absorption des médicaments

2. Placez le sac de glace sur le site d'injection

3. Fournir un accès intraveineux

4. Répétez les étapes 2 à 4 de la norme comme si elles étaient choquées par l'administration intraveineuse

3. Préparez les médicaments, l'équipement, les instruments:

3.1. Adrénaline (amp.), Prednisone (amp.), Diprazine (amp.), Diphenhydramine (amp.), Cimétidine (amp.), Aminophylline (amp.), Polyglucine (fl.), 0,9% chlorure de sodium (fl. .), re-poly Yukin.

3.2. Système pour perfusion intraveineuse, seringues et aiguilles pour injection vm et ir, garrot, appareil IV L, pouls-xymètre, conicotome, kit d'intubation trachéale, sac Ambu.

4. Évaluation des progrès:

4.1. Récupération de la conscience, stabilisation de la pression artérielle, du rythme cardiaque.
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Partie pratique

  1. Partie pratique
    Préparation pour la stérilisation de la verrerie de laboratoire 1. Avant la stérilisation, la verrerie de laboratoire est soigneusement lavée et séchée. 2. Les tubes à essai, bouteilles, bouteilles, matelas, flacons sont fermés avec des bouchons en gaze de coton. Sur le bouchon de chaque récipient (sauf les tubes à essai), placez un capuchon en papier. 3. Boîtes de Petri stérilisées emballées dans du papier pour 1 à 5 pièces ou dans des étuis à crayons. 4. Pipettes Pasteur de 3-5-10-15 pièces
  2. Partie pratique
    Pratique
  3. Partie pratique
    Principes de base et étapes de la recherche bactériologique 1. Choix qualifié du matériel à étudier: pour les échantillons cliniques - en tenant compte de la nature et de la localisation du processus pathologique, de la pathogenèse de la maladie et de son stade; pour les objets environnementaux - en tenant compte de leur valeur possible en tant que voies et facteurs de transmission des micro-organismes - agents pathogènes des infections. 2.
  4. Partie pratique
    Technique de collecte du matériel d'un patient pour la recherche bactériologique Le choix du matériel pour la recherche en laboratoire est déterminé par la localisation du processus pathologique, les caractéristiques de la pathogenèse de la maladie et les propriétés biologiques du pathogène. Le succès de la recherche bactériologique dépend de l'exactitude de l'échantillonnage du matériel. Matériel pathologique pour la recherche bactériologique
  5. PARTIE PRATIQUE
    Prélever un échantillon d'air dans la salle de formation en utilisant la méthode de sédimentation. 2. Prélever un échantillon d'air dans la salle d'entraînement en utilisant une méthode d'aspiration (appareil de Krotov). 3. Déterminer le nombre microbien total dans 1 m3 d'air (utiliser des plaques pré-préparées avec des colonies cultivées). 4. Etudier les propriétés tinctoriales et enzymatiques des colonies cultivées. 5. Résolvez le problème: pour 10
  6. PARTIE PRATIQUE
    Réaliser un prélèvement d'eau du robinet conformément à toutes les règles de la recherche bactériologique. 2. Semez 1 ml d'eau de chaque échantillon dans des boîtes de Pétri stériles avec de la gélose nutritive fondue pour déterminer le nombre total de microbes. 3. Compter les colonies cultivées sur les plaques (pré-préparées) et exprimer le résultat en unités formant colonie (UFC). 4.
  7. PARTIE PRATIQUE
    Préparez un échantillon de sol pour la recherche bactériologique. 2. Pour faire une dilution du sol de 1:10 et une série de dilutions en série de 1: 100; 1: 1000; 1: 10000. 3. Déterminer les bactéries du groupe d'Escherichia coli dans le sol par la méthode de titrage. 4. Détermination du nombre microbien du sol: en utilisant les cultures demonchAHHHbiMH sur MPA de diverses dilutions de la suspension du sol, calculer le microbien
  8. PARTIE PRATIQUE
    Faites une sélection de produits alimentaires (sur les instructions de l'enseignant). 2. Préparez un échantillon pour examen bactériologique. 3. Prélever des échantillons d'aliments pour la recherche bactériologique. 4. Préparez des cotons-tiges pour les prélever. 5. Enlevez les lavages à la main avant le traitement et après le lavage. Semez sur le milieu Endo en utilisant la méthode approfondie MPA. 6. Crop
  9. Partie pratique
    Pratique
  10. Conférences. Psychologie pratique quotidienne et scientifique. Partie 1, 2011
    Types de connaissances psychologiques. Classification des sciences. Critères de la psychologie en tant que science. La place de la psychologie dans le système des sciences. Science. Les principales fonctions de la science. Les principales étapes de la formation de la psychologie en tant que science. Caractéristiques de la science psychologique. La différence entre les connaissances scientifiques et d'autres types de connaissances. Branches de psychologie. Corrélation de la psychologie scientifique et quotidienne. Comparaison de la psychologie scientifique et quotidienne.
  11. Partie 2: «combien»
    Pendant ce temps, quelque chose de complètement différent se produit avec la partie 2. Si la partie 1 montre ce qu'est un objet, alors la partie «combien» mesure la quantité: combien nous avons et combien? Cela semble être un peu, mais celui-ci est bien plus. ↑ Dans le segment «combien», le nombre d'objets que nous voyons est déterminé: quatre d'entre eux, trois autres et bien d'autres
  12. Retour sur la première partie du livre
    Les commentaires que nous avons reçus sur la première partie de la «Collection de jeux pour le développement de la pensée systémique» peuvent être décrits comme extrêmement positifs. Un des lecteurs nous a écrit: "En fait, votre livre comble le fossé entre la théorie de la pensée systémique et son application pratique." Un autre a dit: «Je peux vraiment utiliser ces exercices à bon escient.» Troisièmement: «Depuis des années, je recherche des
  13. Partie 6: Pourquoi
    Notre cerveau n'est pas satisfait de la connaissance de ce qui est exactement devant nous, en quelle quantité, où exactement, quand tel ou tel événement se produit et comment les objets interagissent les uns avec les autres. Cause et effet - les choses sont certainement importantes, mais en fait, notre cerveau veut connaître la réponse à la question «pourquoi». Pourquoi une chose se passe-t-elle et pas l'autre? Pourquoi quelque chose arrive-t-il maintes et maintes fois
  14. Partie environnementale
    Les causes de la gastrite sont diverses. La première place appartient à des facteurs externes. Ceux-ci comprennent des groupes alimentaires de mauvaise qualité et inappropriés pour les groupes d'âge et le type d'animaux, la présence de plantes toxiques et de substances toxiques dans les aliments, l'utilisation d'aliments chauds et congelés pour l'alimentation et la violation du régime alimentaire. De plus, la survenue d'une gastrite contribue à l'uniformité et à l'infériorité
  15. Partie 3: «où / où»
    Alors que les tâches de détermination de l'objet et des calculs associés sont résolues dans les parties 1 et 2, dans la partie 3 (la façon de voir «où / où»), le mouvement de chaque objet est noté et suivi à la fois par rapport à d'autres objets et par rapport à nous-mêmes *. Dans la partie 3, cela se fait en traitant les termes du signal visuel entrant contenant des indices sur l'emplacement, par exemple
  16. .Introduction
    Enregistrement d'un cadavre • type d'animal; • sexe, surnom; • numéro d'inventaire; • âge; • costume: • présages; • se reproduire; • à qui appartient (le propriétaire) et adresse: • date du décès; • date et lieu d'ouverture. • effectué une autopsie (nom, prénom, patronyme, position); • étaient présents à l'autopsie (nom, prénom, patronyme, fonction). Description de l'enregistrement d'un cadavre
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