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Partie pratique

Principes de base et étapes de la recherche bactériologique

1. Choix qualifié du matériel à étudier: pour les échantillons cliniques - en tenant compte de la nature et de la localisation du processus pathologique, de la pathogenèse de la maladie et de son stade; pour les objets environnementaux - en tenant compte de leur valeur possible en tant que voies et facteurs de transmission des micro-organismes - agents pathogènes des infections.

2. Échantillonnage de matériel pour la recherche dans le volume nécessaire et suffisant. Assurer la livraison rapide du matériel pour maintenir la viabilité des bactéries désirées.

3. La sélection de l'ensemble optimal de milieux nutritifs appropriés pour le semis initial et l'accumulation du pathogène, en tenant compte de la nature du matériel, des propriétés du micro-organisme souhaité et des doses de semis.

4. Respect des principes classiques d'une étude approfondie des cultures.

5. L'étude des caractéristiques phénotypiques des cultures pures isolées, principalement des propriétés biochimiques avec la standardisation la plus élevée possible des conditions de leur détermination.

6. La définition selon les tableaux de classification de la position taxonomique de la culture sélectionnée en fonction des objectifs de l'étude (générique, espèce, affiliation intraspécifique). La recherche bactériologique se déroule en plusieurs étapes:

1. Semis du matériau livré dans le milieu d'enrichissement. Pour certains types de matériaux, ils sont préalablement préparés pour la plantation, puis les cultures sont incubées pour toutes les espèces dans des conditions correspondant aux propriétés des bactéries désirées.

2. L'étude des tasses avec des cultures. Isolement des cultures pures des colonies prévues pour une étude plus approfondie en utilisant des milieux combinés pour l'identification primaire.

3. Prise en compte des résultats de l'inoculation dans des milieux combinés après 18 à 20 heures d'incubation. L'étude des propriétés morphologiques et tinctoriales. Cultures pour la reproduction des tests de la rangée de différenciation minimale. I Une étude indicative des cultures dans les réactions d'agglutination.

4. Détermination du genre et du type de micro-organismes sur la base de la prise en compte des résultats des cultures dans l'environnement de la série de différenciation minimale. Si nécessaire, effectuez des cultures pour déterminer des caractéristiques biochimiques supplémentaires.

5. Prise en compte des tests biochimiques supplémentaires.

Schéma de diagnostic bactériologique de la colientérite

L'examen bactériologique du contenu d'Escherichia coli entéropathogène est soumis à des selles, des vomissements, du mucus du pharynx et du nez, tout en examinant le matériel en coupe - sang du cœur, un morceau de poumon, le foie, la rate, les reins, des sections de l'intestin grêle et du gros intestin.

Si les selles ne peuvent pas être livrées au laboratoire dans les deux premières heures suivant leur capture, elles sont stockées dans un glacier à une température de + 4 ° C, mais pas plus d'une journée ou en conserve dans un mélange de glycérine.

Étant donné qu'avec la colientérite, l'intestin grêle est principalement affecté, il est plus judicieux d'examiner la dernière portion de matières fécales.

1er jour: le matériel reçu pour l'étude est ensemencé sur un milieu nutritif solide accumulé: Endo, Levine, ICA.

Lors du semis de matières fécales, une petite quantité de matière est émulsifiée dans du sérum physiologique. Après la décantation de grosses particules de la surface du liquide, 1 à 2 gouttes de la suspension préparée sont prises, introduites dans une boîte de Pétri et broyées dans une petite zone du milieu nutritif avec une spatule en verre stérile. Ensuite, la spatule est arrachée de la surface de la gélose, et sans la brûler, répartissez le reste du matériau sur le reste de la surface de la cupule.

2ème jour: visualisez les récoltes faites la veille.
Les colonies d'E. Coli entéropathogènes ne diffèrent pas des colonies d'E. Coli non pathogènes. Sur les tasses avec Endo medium, elles ont une forme ronde, un bord lisse, une surface mate, de couleur rouge framboise.

Sur les 10 colonies isolées présentant des caractéristiques culturelles et morphologiques caractéristiques d'E. Coli, une partie du matériel pour l'agglutination sur verre est prélevée de façon à ce que la partie restante de la colonie puisse être utilisée pour des recherches supplémentaires si nécessaire. La réaction d'agglutination sur verre avec du sérum OB-coli complexe d'agglutination non dilué est réglée séparément avec le matériau de chaque colonie.

Avec un résultat positif de la réaction d'agglutination, la culture étudiée dans la première minute d'observation forme de gros flocons d'agglutination bien visibles à l'œil simple. Du matériel provenant de 3 à 5 colonies, dont les bactéries ont été agglutinées avec un mélange de sérums sur une lame de verre, est semé dans des tubes à essai avec de la gélose à la viande et à la peptone (MPA) biseautée pour une étude plus approfondie de la culture pure.

3ème jour: voir les cultures sur l'AMP en pente. À la surface de la gélose, Escherichia coli forme un revêtement humide, brillant et grisâtre. Les cultures cultivées sur MPA sont testées à nouveau dans une réaction d'agglutination sur verre.

Une culture microbienne cultivée sur un MPA biseauté et donnant une réaction d'agglutination répétée sur verre est réensemencée:

a) étudier les propriétés saccharolytiques dans l'environnement His avec le glucose, le lactose, le mannitol, le maltose, le saccharose; b) pour la détection de l'indole dans un tube à essai avec du bouillon Hot Tinger; c) pour la détection de sulfure d'hydrogène dans la viande et le bouillon de peptone; d) afin de détecter la mobilité active, un semis en gélose nutritive semi-liquide est effectué.

4ème jour: les études réalisées sont enregistrées dans le protocole.

Le schéma des études microbiologiques des salmonelles

La méthode la plus ancienne et la plus fiable pour le diagnostic de la fièvre typhoïde et de la paratyphoïde doit être considérée comme la sélection de l'hémoculture, car la bactériémie chez les patients survient à partir de la fin de la période d'incubation et se poursuit tout au long de la période fébrile de la maladie. La fréquence d'isolement de l'agent pathogène du sang du patient au cours de la première semaine de la maladie atteint 100%. A partir de la 2ème semaine, le pourcentage de résultats positifs diminue. Le sang pour l'inoculation est prélevé dans la veine du coude: la 1ère semaine à raison de 10 ml, la 2ème et la 3ème semaine - 15-20 ml.

À partir de la 3e semaine de la maladie, du fait que le processus pathologique et, par conséquent, l'agent causal de la maladie sont concentrés dans l'appareil lymphatique de l'intestin, un isolement intensif des bactéries des selles commence.

Isolement des bactéries typhoïdes du sang le premier jour: le sang du patient est inoculé immédiatement après avoir pris 10 à 20% de bouillon de gall dans un flacon. La bile contenue dans les milieux de culture favorise la croissance des salmonelles et empêche la coagulation sanguine.

2ème jour: regardez à travers les flacons avec les récoltes faites la veille. La croissance des bactéries dans le bouillon de gall dans les 2-3 premiers jours après le semis n'est pas toujours accompagnée de turbidité. Par conséquent, indépendamment du fait que le milieu soit trouble ou non, ils sont plaqués sur des plaques avec de la gélose au sulfite de bismuth et du milieu de Ploskirev. Les milieux inoculés sont placés dans un thermostat avec l'hémoculture primaire. Ce dernier est conservé pour des semis répétés au cas où des colonies caractéristiques des salmonelles ne seraient pas trouvées sur des milieux nutritifs solides. Un ensemencement répété à partir de milieux d'enrichissement est effectué les 2e, 3e, 5e, 7e et 10e jours. En l'absence de colonies caractéristiques après ensemencement effectué le 10ème jour, le laboratoire donne une réponse négative et arrête l'étude.
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Partie pratique

  1. Partie pratique
    Préparation pour la stérilisation de la verrerie de laboratoire 1. Avant la stérilisation, la verrerie de laboratoire est soigneusement lavée et séchée. 2. Les tubes à essai, bouteilles, bouteilles, matelas, flacons sont fermés avec des bouchons en gaze de coton. Sur le bouchon de chaque récipient (sauf les tubes à essai), placez un capuchon en papier. 3. Boîtes de Petri stérilisées emballées dans du papier pour 1 à 5 pièces ou dans des étuis à crayons. 4. Pipettes Pasteur de 3-5-10-15 pièces
  2. Partie pratique
    Pratique
  3. Partie pratique
    Formulation de la réaction d'agglutination sur verre et dans des tubes à essai Dans toutes les réactions immunologiques, le composant principal est un antigène qui a deux propriétés: 1) la capacité de provoquer un processus immunologique dans le corps; 2) la capacité de se lier aux anticorps dans les réactions sérologiques. La réaction d'un anticorps avec un antigène est appelée sérologique (du lat. Sérum -
  4. Partie pratique
    Technique de collecte du matériel d'un patient pour la recherche bactériologique Le choix du matériel pour la recherche en laboratoire est déterminé par la localisation du processus pathologique, les caractéristiques de la pathogenèse de la maladie et les propriétés biologiques du pathogène. Le succès de la recherche bactériologique dépend de l'exactitude de l'échantillonnage du matériel. Matériel pathologique pour la recherche bactériologique
  5. PARTIE PRATIQUE
    Prélever un échantillon d'air dans la salle de formation en utilisant la méthode de sédimentation. 2. Prélever un échantillon d'air dans la salle d'entraînement en utilisant une méthode d'aspiration (appareil de Krotov). 3. Déterminer le nombre microbien total dans 1 m3 d'air (utiliser des plaques pré-préparées avec des colonies cultivées). 4. Etudier les propriétés tinctoriales et enzymatiques des colonies cultivées. 5. Résolvez le problème: pour 10
  6. PARTIE PRATIQUE
    Réaliser un prélèvement d'eau du robinet conformément à toutes les règles de la recherche bactériologique. 2. Semez 1 ml d'eau de chaque échantillon dans des boîtes de Pétri stériles avec de la gélose nutritive fondue pour déterminer le nombre total de microbes. 3. Compter les colonies cultivées sur les plaques (pré-préparées) et exprimer le résultat en unités formant colonie (UFC). 4.
  7. PARTIE PRATIQUE
    Préparez un échantillon de sol pour la recherche bactériologique. 2. Pour faire une dilution du sol de 1:10 et une série de dilutions en série de 1: 100; 1: 1000; 1: 10000. 3. Déterminer les bactéries du groupe d'Escherichia coli dans le sol par la méthode de titrage. 4. Détermination du nombre microbien du sol: en utilisant les cultures demonchAHHHbiMH sur MPA de diverses dilutions de la suspension du sol, calculer le microbien
  8. PARTIE PRATIQUE
    Faites une sélection de produits alimentaires (sur les instructions de l'enseignant). 2. Préparez un échantillon pour examen bactériologique. 3. Prélever des échantillons d'aliments pour la recherche bactériologique. 4. Préparez des cotons-tiges pour les prélever. 5. Enlevez les lavages à la main avant le traitement et après le lavage. Semez sur le milieu Endo en utilisant la méthode approfondie MPA. 6. Crop
  9. Partie pratique
    Pratique
  10. Conférences. Psychologie pratique quotidienne et scientifique. Partie 1, 2011
    Types de connaissances psychologiques. Classification des sciences. Critères de la psychologie en tant que science. La place de la psychologie dans le système des sciences. Science. Les principales fonctions de la science. Les principales étapes de la formation de la psychologie en tant que science. Caractéristiques de la science psychologique. La différence entre les connaissances scientifiques et d'autres types de connaissances. Branches de psychologie. Corrélation de la psychologie scientifique et quotidienne. Comparaison de la psychologie scientifique et quotidienne.
  11. Partie 2: «combien»
    Pendant ce temps, quelque chose de complètement différent se produit avec la partie 2. Si la partie 1 montre ce qu'est un objet, alors la partie «combien» mesure la quantité: combien nous avons et combien? Cela semble être un peu, mais celui-ci est bien plus. ↑ Dans le segment «combien», le nombre d'objets que nous voyons est déterminé: quatre d'entre eux, trois autres et bien d'autres
  12. Retour sur la première partie du livre
    Les commentaires que nous avons reçus sur la première partie de la «Collection de jeux pour le développement de la pensée systémique» peuvent être décrits comme extrêmement positifs. Un des lecteurs nous a écrit: "En fait, votre livre comble le fossé entre la théorie de la pensée systémique et son application pratique." Un autre a dit: «Je peux vraiment utiliser ces exercices à bon escient.» Troisièmement: «Depuis des années, je recherche des
  13. Partie 6: Pourquoi
    Notre cerveau n'est pas satisfait de la connaissance de ce qui est exactement devant nous, en quelle quantité, où exactement, quand tel ou tel événement se produit et comment les objets interagissent les uns avec les autres. Cause et effet - les choses sont certainement importantes, mais en fait, notre cerveau veut connaître la réponse à la question «pourquoi». Pourquoi une chose se passe-t-elle et pas l'autre? Pourquoi quelque chose arrive-t-il maintes et maintes fois
  14. Partie environnementale
    Les causes de la gastrite sont diverses. La première place appartient à des facteurs externes. Ceux-ci comprennent des groupes alimentaires de mauvaise qualité et inappropriés pour les groupes d'âge et le type d'animaux, la présence de plantes toxiques et de substances toxiques dans les aliments, l'utilisation d'aliments chauds et congelés pour l'alimentation et la violation du régime alimentaire. De plus, la survenue d'une gastrite contribue à l'uniformité et à l'infériorité
  15. Partie 3: «où / où»
    Alors que les tâches de détermination de l'objet et des calculs associés sont résolues dans les parties 1 et 2, dans la partie 3 (la façon de voir «où / où»), le mouvement de chaque objet est noté et suivi à la fois par rapport à d'autres objets et par rapport à nous-mêmes *. Dans la partie 3, cela se fait en traitant les termes du signal visuel entrant contenant des indices sur l'emplacement, par exemple
  16. .Introduction
    Enregistrement d'un cadavre • type d'animal; • sexe, surnom; • numéro d'inventaire; • âge; • costume: • présages; • se reproduire; • à qui appartient (le propriétaire) et adresse: • date du décès; • date et lieu d'ouverture. • effectué une autopsie (nom, prénom, patronyme, position); • étaient présents à l'autopsie (nom, prénom, patronyme, fonction). Description de l'enregistrement d'un cadavre
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